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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等 |
動物細(xì)胞/組織 |
2-8℃ |
BH-D85212 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
抗頂體蛋白抗體 48T/96T
次級組織趨化因子 48T/96T
抗神經(jīng)元核抗體1型 48T/96T
小鼠肝脂酶(HL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
黃曲霉(Aflatoxin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌酸激酶(CK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人甲胺喋呤(MTX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒熒光素標(biāo)記內(nèi)收蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Adducin protein/FITC
熒光素標(biāo)記蛋白激酶B2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-AKT2/FITC
熒光素標(biāo)記Apelin receptor抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Apelin receptor/APJ receptor /FITC
熒光素標(biāo)記P53凋亡刺激蛋白2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ASPP2/FITC
熒光素標(biāo)記β分泌酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-BACE/ASP2 /FITC
熒光素標(biāo)記CD203c抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD203c/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho- Beta-Catenin (Thr41/Ser45) /FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC
熒光素標(biāo)記表面趨化因子受體2A抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CCR-2A/FITC
熒光素標(biāo)記CD30抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD30/TNFRSF8/FITC
生物素化癌胚抗原抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CEA/Biotin
Zein 玉米蛋白 25g 瓶
EB染色液 10mg/ml 5ml 瓶
Liquid Sabourand Medium 液體沙氏培養(yǎng)基 250g 瓶
兔抗人纖維蛋白原(血清) 0.5ml 支
顯影粉 1L 盒
50ml離心管,20包-箱 25支 包
DAPI溶液(1mg/ml) 1ml 支
Silymarin 水飛薊賓 22888-70-6 20mg
Liriopesides B 山麥冬皂苷B 182284-68-0 20mg
3,'6-Disinapoyl sucrose 3,'6-二芥子?;崽?139891-98-8 20mg