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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
土壤蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
土壤 |
2-8℃ |
BH-D85260 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β2腎上腺素能受體(β2-AR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
封閉蛋白1 48T/96T
鵝甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
過(guò)氧化物膜蛋白3 48T/96T
小鼠抗IgE受體抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
土壤蛋白提取試劑盒多能發(fā)育相關(guān)基因2抗原 規(guī)格: 0.5mg DPPA2 (developmental pluripotency associated gene2)
植物擴(kuò)張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原 規(guī)格: 0.5mg ATEXPA10 peptide
糖蛋白A33(跨膜)抗原 規(guī)格: 0.5mg GPA33(glycoprotein A33 transmembrane)
標(biāo)簽DYKDDDDK Tag分支肽 規(guī)格: 0.5mg DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag
白介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子 規(guī)格: 0.5mg IL-18/IGIF(Interleukin-18)
人促黃體**素(多肽) 規(guī)格: 0.5mg LH(Luteinizing Hormone)
核因子2相關(guān)因子2抗原 規(guī)格: 0.5mg Nrf2 peptide
多藥耐藥相關(guān)蛋白2 規(guī)格: 0.5mg MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)
胃蛋白酶原C蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg Pepsinogen C peptide
臂板蛋白3A(多肽) 規(guī)格: 0.5mg Sema3A (semaphorin 3A)
新型抑癌基因(多肽) 規(guī)格: 0.5mg TBX2/T-box2(T-box Protein 2)
Aflatoxin G1 黃曲G1 1165-39-5 1mg
Oxytetracycline HCl 鹽酸土霉素 2058-46-0 100mg
O-Phthalic acid 鄰苯二甲酸 88-99-3 20mg
透析袋 扁寬16 截留分子量300000 0.5m/即用型 管
封板膜 100張 包
Pyrogallol 焦性沒(méi)食子酸 (鄰苯三酚) 100g 瓶
Brassinolide 24-表油菜素內(nèi)酯 25mg 瓶
Potassium gluconate 葡萄糖酸鉀 100g 瓶
DiI 熒光染料 10mg 瓶
FITC 異硫氰酸熒光素 50mg 支