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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
血液?jiǎn)魏思?xì)胞蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動(dòng)物血液 |
2-8℃ |
BH-D85264 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
多聚ADP核糖聚合酶 48T/96T
猴子α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠內(nèi)(ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/OCN/BGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子催乳素(PRL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛結(jié)核(TB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鈣網(wǎng)蛋白 48T/96T
血液?jiǎn)魏思?xì)胞蛋白提取試劑盒人鈣結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T CR(Human Calretinin) ELISA Kit
人脂蛋白磷脂酶A2 規(guī)格: 48T Lp-PL-A2(Human lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit
人吡哆醛/吡哆醇維生素B6激酶 規(guī)格: 48T PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit
人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格: 48T PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit
人β甘露糖苷酶 規(guī)格: 48T Beta Manase(Human Alpha mannosidase) ELISA Kit
人泛素分解酶 規(guī)格: 48T DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit
人α肌動(dòng)蛋白 規(guī)格: 48T Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit
人胃蛋白酶原C 規(guī)格: 48T PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit
人帕金森氏病2Parkin 規(guī)格: 48T Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit
人甘露糖 規(guī)格: 48T MN(Human Mannose) ELISA Kit
人鈣離子通道抗體 規(guī)格: 48T VGCC(Human voltage-gated calcium channel) ELISA Kit
Methyl-β-cyclodextrin 甲-β-環(huán)糊精 25g 瓶
Dextran Sulfate 硫酸葡聚糖 10g 瓶
Sepharose 6B 瓊脂糖凝膠6B 100ml 瓶
甲苯胺藍(lán)溶液 100ml 瓶
Ribavirin 利巴韋林 5g 瓶
D-Glutamic acid D-谷氨酸 10g 瓶
BL21(DE3)感受態(tài) 20×100u l 袋
土壤基因組DNA提取試劑盒 50T 盒
兔抗親和素-HRP 0.1ml 支
藍(lán)色預(yù)染次高分子量蛋白質(zhì)Marker 10T 支