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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
植物核蛋白/細胞器蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
植物 |
2-8℃ |
BH-D85312 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人胰島細胞抗體(ICA)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
羊雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人熱休克因子1(HSF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白 48T/96T
大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
植物核蛋白/細胞器蛋白提取試劑盒熒光素標記層粘連蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-LN /FITC
熒光素標記微管相關(guān)蛋白2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MAP-2/FITC
熒光素標記磷酸化肌增強因子2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-MEF2A (Thr312) /FITC
熒光素標記磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-MYPT1 (Ser507)/FITC
熒光素標記線粒體核糖體蛋白L28抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MrpL28 /FITC
熒光素標記DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NBS1/FITC
熒光素標記核有絲分裂器NuMA蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NuMA/FITC
熒光素標記磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser927) /FITC
熒光素標記神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NSE/FITC
熒光素標記P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-P27/kip1 /FITC
熒光素標記乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PALB2/FITC
Bis Benzimide Hoechst NO33258 熒光染料 25mg 支
Guanosine 鳥苷 10g 瓶
Lysozyme 溶酶 5g 瓶
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) 1ml 支
生物素-BSA 0.1ml 支
Tetrabutylammonium hydrogen sulfate 四丁基硫酸氫銨 100g 瓶
Benzyltrimethylammonium chloride 芐基化銨 500g 瓶
Tetraethylammonium bromide 四乙基溴化銨 100g 瓶
Tetramethylammonium bromide 四甲溴化銨 100g 瓶
Picloram 毒莠啶 1g 瓶