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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
蛋白酶抑制劑混合物 |
250ul/ 1ml |
|
蛋白 |
室溫 |
BH-D85388 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠心鈉肽(ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠C型鈉尿肽(CNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甲狀腺素抗體 48T/96T
人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
促卵泡素 48T/96T
蛋白酶抑制劑混合物CD44V4抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD44v4
磷酸化周期素依賴(lài)激酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-cdc2 (Thr161)
著絲粒蛋白A 規(guī)格: 0.2ml Anti-CENPA
角蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CK18
環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CNGA2
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CREB-1
CD299抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-DC-SIGNR/CD299
周期素D3抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Cyclin D3
磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr299)
磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173)
EphB2 R抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-EphB2 R
Myricetin 楊梅素 529-44-2 20mg
9-Aminocamptothecin 9-氨基喜樹(shù)堿 91421-43-1 20mg
Ethyl gallate 沒(méi)食子酸乙酯 831-61-8 20mg
3-Methylvaleric Acid 3-甲戊酸 105-43-1 200mg
Levamisole Hydrochloride 鹽酸咪唑 16595-80-5 100mg
50ml注射器 國(guó)產(chǎn) 1支 袋
稱(chēng)量紙 100mm×100mm 100張-包 包
4-Nitrophenyl alpha-D-Galactopyranoside 4-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷 100mg 瓶
Urea 尿素 1kg 瓶
Lithium Chloride 化鋰 100g 瓶