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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
Benzonase核酸酶/全能核酸酶 |
25KU/100KU |
|
蛋白 |
-20℃保存 |
BH-D85412 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鼻咽癌病毒(NPCV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素5(IL-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛α乳清蛋白(α-La)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
補(bǔ)體蛋白2 48T/96T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乳酸 48T/96T
人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benzonase核酸酶/全能核酸酶熒光素標(biāo)記干擾素-β抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-IFN- Beta/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC
熒光素標(biāo)記白介素-17E抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-IL-17E/IL-25/FITC
熒光素標(biāo)記整合素αVβ5抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Integrin AlphaV Beta5/FITC
熒光素標(biāo)記c-Jun氨基末端激酶1/3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-JNK1/3 /FITC
熒光素標(biāo)記牛β-乳球蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti- Beta-lactoglobulin/FITC
熒光素標(biāo)記 植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ATEXPA10 /FITC
熒光素標(biāo)記腸上皮干蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Lgr5/GPR49/FITC
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記髓鞘堿性蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MBP/HRP
熒光素標(biāo)記巨噬炎性蛋白3α抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MIP3 Alpha/CCL20/FITC
熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MMP-16/FITC
雞外周血分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
Phloretin 根皮素 60-82-2 20mg
Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside 升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷 161207-05-2 10mg
Ganoderenic acid A 靈芝酸A 81907-62-2 20mg
Cinnamaldehyde 肉桂醛 104-55-2 20mg
Maltose 麥芽糖 69-79-4 20mg
Xylocaine 利多卡因 137-58-6 100mg
L(+)-Asparagine monohydrate L-天冬酰胺一水 5794-13-8 200mg
人IgG干粉 10mg 支
Turpentine oil 松節(jié)油 100ml 瓶