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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒 |
50T/100T |
提取 |
植物 |
2-8℃ |
BH-D85436 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
鵝血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
骨成型蛋白-7 48T/96T
小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
抗核糖核蛋白抗體 48T/96T
AMP激活的蛋白激酶A1催化亞基 48T/96T
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
載脂蛋白C3 48T/96T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒熒光素標(biāo)記抗核心蛋白聚糖抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DCN/FITC
熒光素標(biāo)記抗橋粒斑蛋白2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DP II /FITC
熒光素標(biāo)記抗內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ECE2/FITC
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希桿O6抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/HRP
熒光素標(biāo)記Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ets1/E26 /FITC
熒光素標(biāo)記磷酯酶Cγ2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PLCG 2/PLC gamma 2/FITC
熒光素標(biāo)記粒-巨噬集落刺激因子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CSF3/FITC
熒光素標(biāo)記促卵泡刺抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-FSH/FITC
熒光素標(biāo)記風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Glycoprotein /FITC
熒光素標(biāo)記葡萄糖合成激酶-3α抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-GSK-3 Alpha /FITC
熒光素標(biāo)記人巨病毒UL49抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-HCMV UL49/FITC
Hoechst 33342染色液(即用型) 50ml 瓶
Adenosine Deaminase ADA 腺苷脫氨酶(酶活200U/mg) 200U 瓶
Valnemulin Hydrochloride 鹽酸沃尼妙林 1g 瓶
Locust bean gum 刺槐豆膠 100g 瓶
GoldView I 型核酸染色劑(10000×) 1ml 瓶
兔抗小鼠IgG(血清) 0.5ml 支
定影粉 1L 盒
175cm2正方斜口濾膜培養(yǎng)瓶 5個(gè) 包
DAPI溶液(1mg/ml) 10×1ml 套
Sinensetin 甜橙黃酮 2306-27-6 20mg