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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
細(xì)胞懸液制備試劑盒 |
100ml |
|
|
|
BH-D85472 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠尾加壓素II(Urotensin II) ELISA試劑盒 96T/48T ELISA試劑盒 組裝/原裝
羊促黃體(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人卵泡刺(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β-聯(lián)蛋白 48T/96T
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞懸液制備試劑盒層粘連蛋白β1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Laminin Beta 1
磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-MARCKS (Ser162)
單核趨化蛋白1抗體(人) 規(guī)格: 0.2ml Anti-MCP-1/CCL2
中腦核仁蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Midnolin isoform Protein 1
多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-MRP4/ABCC4
核小體組裝蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-NAP1/NAP1L1
一氧化氮抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Nitric oxide/NO
高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-NF-H
NADH復(fù)合體1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-MT-ND1
P2Y4受體抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-P2Y4R/P2Ry4
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229)
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