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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
ELISA包被緩沖液(10×) |
100ml/500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85578 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
環(huán)氧合酶-2 48T/96T
豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
抗單鏈DNA抗體 48T/96T
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
凝血因子IX 48T/96T
兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠雙酪氨酸(dityrosine)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人丙型肝炎病毒(HCV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
ELISA包被緩沖液(10×)熒光素標記視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Rb/RB1 protein/FITC
熒光素標記磷酸化周期檢控Rad17蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC
熒光素標記鈣結(jié)合蛋白S100A8抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-S100-A8/MRP8/CFAG/FITC
熒光素標記Ⅱ型成對球蛋白樣受體β蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC
熒光素標記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC
熒光素標記生長抑素受體2(SSTR2)抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-SSTR2 /FITC
熒光素標記轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-TGM3/FITC
熒光素標記磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-TAK1 (Ser412)/FITC
熒光素標記腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-TNFAIP1/FITC
熒光素標記生精凋亡相關(guān)基因3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-TSARG3/FITC
熒光素標記尿皮質(zhì)素UCN3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Urocortin 3/FITC
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