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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
10%過(guò)硫酸銨 |
10ml/ 100ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85612 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
豬細(xì)胞色素氧化酶(CC0)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長(zhǎng)釋放因子(GH-RF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性白細(xì)胞分化抗原28(sCD28)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血液結(jié)合素 48T/96T
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6 48T/96T
人5,10亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(VEGF165) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經(jīng)激肽A(NKA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠性結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
克拉拉細(xì)胞蛋白CC16 48T/96T
10%過(guò)硫酸銨6磷酸果糖激酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-PFK2/PFKFB3
尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-PLAUR
蛋白激酶AKT底物1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1
癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD66a/CEACAM1
磷酸化指狀蛋白RET抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-Ret (Tyr905)
S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-SAMDC
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Smad3
大腸桿志賀樣Ⅱ型突變體(O139型)抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Shiga-like toxin IIe variant subunit A
磷酸化類(lèi)固醇受體輔助活化因子-3 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-SRC-3 (Thr24)
突觸泡蛋白2A抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-SV2A
翻譯控制腫瘤蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-TCTP
乳桿選擇性培養(yǎng)基(LBs瓊脂) 250(g)
馬鈴薯瓊脂 100(g)
酪胨-卵磷脂-吐溫20液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
擬桿選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(改良GAM瓊脂基礎(chǔ)) 250(g)
梭增培養(yǎng)基 250(g)
腸球培養(yǎng)基基礎(chǔ)(疊氮鈉-結(jié)晶紫-七葉苷瓊脂) 250(g)
R2A 瓊脂 250(g)
去氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 250(g)
改良Y培養(yǎng)基 250(g)
厭氧液體培養(yǎng)基 250(g)