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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
Von Ebener's液 |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85648 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子抗體 48T/96T
小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠孕/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗核仁抗體(ANA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛副流感病毒III,PIV-III,ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Von Ebener's液熒光素標記驢抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml Donkey Anti-human IgG/FITC
金標記親合素(10nm/15nm) 規(guī)格: 0.1ml Avidin/Gold
(親和層析純化) 規(guī)格: 1mg Rabbit Anti-human k-chain
標準胎牛血清 規(guī)格: 200ml
兔抗小鼠k-鏈抗血清 規(guī)格: 1ml Rabbit Anti-mouse IgG1 kappa-chain Whole serum
粘附多肽GRGDS 規(guī)格: 1mg GRGDS peptide
Bcl-2(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg Bcl-2(抗原)
α-1抗胰蛋白酶(抗原) 規(guī)格: 0.5mg AAT(Alpha-1Anti-tiypsin)
多巴胺脫羧酶(抗原) 規(guī)格: 0.5mg DDC (DOPA decarboxylase)
94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原) 規(guī)格: 0.5mg GRP94 (gp96)
瘦素受體(長)(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Leptin receptor(long)
Brain-heart broth 腦心肉湯 1.10493.0500MERCK默克
Brain-heart agar 腦心瓊脂 1.13825.0500MERCK默克
BRILA broth brilliant green-bile-lactcose broth 亮綠乳糖膽鹽肉湯 1.05454.0500MERCK默克
BROLACIN Agar(C.L.E.D agar) bromothymol-blue lactose cystine agar 1.01638.0500MERCK默克
Brucella agar 布魯氏瓊脂 1.10490.0500MERCK默克
BROLAC Agar bromothymol-blue lactose agar 溴百里酚藍乳糖瓊脂 1.01639.0500MERCK默克
Calcium caseinate agar acc.to FRAZIER and RUPP,modified 1.05409.0500MERCK默克
溴百里酚藍乳糖胱氨酸瓊脂
Bromocresol-purple azide broth 溴甲酚紅紫疊氮肉湯 1.03032.0500MERCK默克
酪蛋白鈣瓊脂