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奧托氏菌保藏方法的介紹
日期:2024-11-22 18:53
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摘要:
奧托氏菌菌種在傳代保藏過(guò)程中,易發(fā)生衰退、變異、污染、死亡,因此必須定期檢查。將菌種接種至液體培養(yǎng)基內(nèi)使之復(fù)活,重新分離,純化開(kāi)成單個(gè)菌落,再作菌種檢定,包括菌落形態(tài)、顏色,染色性、鏡下觀察菌體形態(tài)等,必要時(shí)可做生化試驗(yàn)及血清學(xué)反應(yīng)。
菌種經(jīng)人工傳代保藏過(guò)程中,由于自發(fā)突變而引起特性變?nèi)趸蛳鶠榫N衰退。使衰退的菌種重新恢復(fù)原來(lái)的優(yōu)良特性,稱為菌種復(fù)壯。常用方法有:
①分離純化:將菌種接種至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí),取菌液在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上分區(qū)劃線,培養(yǎng)后挑取典型單個(gè)菌落。
②宿主復(fù)壯:產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)將退化菌種接種到相應(yīng)昆蟲(chóng)或動(dòng)植物宿主體內(nèi),傳種數(shù)代可恢復(fù)其原有的特性與毒力。
奧托氏菌保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋**的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
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