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PCR反應?陰性對照出現(xiàn)明顯擴增分析
日期：2024-11-22 12:24
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摘要：
PCR反應陰性對照出現(xiàn)明顯擴增
1、 反應體系組分（如水）被污染：實驗過程中，更換新的Mix或者水重復實驗。
2、 標本間的交叉污染或產物污染：反應體系在超凈工作臺內配制，對實驗室進行嚴格的區(qū)分，減少氣溶膠污染；使用帶濾芯的槍頭。
3、 引物二聚體的出現(xiàn)：引物設計不夠優(yōu)化：應避免引物二聚體和發(fā)夾結構的出現(xiàn)。
4、引物濃度不佳：適當降低引物的濃度，并注意上下游引物的濃度配比。在35循環(huán)后陰性對照出現(xiàn)擴增屬正常情況，可配合熔解曲線進行分析。
PCR反應陰性對照出現(xiàn)明顯擴增
2、 標本間的交叉污染或產物污染：反應體系在超凈工作臺內配制，對實驗室進行嚴格的區(qū)分，減少氣溶膠污染；使用帶濾芯的槍頭。
3、 引物二聚體的出現(xiàn)：引物設計不夠優(yōu)化：應避免引物二聚體和發(fā)夾結構的出現(xiàn)。
4、引物濃度不佳：適當降低引物的濃度，并注意上下游引物的濃度配比。在35循環(huán)后陰性對照出現(xiàn)擴增屬正常情況，可配合熔解曲線進行分析。