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HRP底物氯萘酚操作步驟
日期：2024-11-25 12:02
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摘要：HRP底物氯萘酚操作步驟
氯萘酚可以形成一種藍黑色產(chǎn)物。敏感性低于DAB，且產(chǎn)物可溶于醇中。它適用于當DAB反應(yīng)形成較高背景或要求改變產(chǎn)物的顏色。
1、需要的溶液和特殊設(shè)備
0.03％氯萘酚，用無水乙醇溶解(貯存在-20℃)，0.05 mol／LTris(pH7.6)，過氧化氫，Gelvatol或者Mowiol，光學(xué)顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。
2、 操作步驟
(1) 氯萘酚貯存液的準備：用10 mL無水乙醇溶解0.3 g氯萘酚，貯存于-20℃；
(2) 加100 μL 氯萘酚貯存液至10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6)；
(3) 加0.1 mL 3％過氧化氫于水中。過氧化氫一般是以30％的溶液提供，4℃可存放1個月；
(4) 白色沉淀可用濾紙過濾去除；
(5) 加此溶液到標本中，并在室溫孵育10～40 min，水洗終止反應(yīng)；
(6) 優(yōu)化：如果需要，進行復(fù)染，但只可使用水溶性染料；
(7) 用Gelvatol或者Mowiol封片。