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PCR產(chǎn)物量過(guò)少處理辦法
日期：2024-11-22 10:19
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摘要：
PCR產(chǎn)物量過(guò)少處理辦法：
1、退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。
2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。
3、PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。
4、引物量不足。增加體系中引物含量。
5、延伸時(shí)間太短。以1 kb/min的原則設(shè)置延伸時(shí)間。
6、變性時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。變性時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。
PCR產(chǎn)物量過(guò)少處理辦法：
1、退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。
2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。
3、PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。
4、引物量不足。增加體系中引物含量。
5、延伸時(shí)間太短。以1 kb/min的原則設(shè)置延伸時(shí)間。
6、變性時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。變性時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。