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服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T流感病毒H12亞型PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63232 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
一氧化氮合酶(NOS)ELISA試劑盒 NOS ELISA Kit 早老素穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌酶組件蛋白APH1抗體英文名稱:Aph-1b 0.2ml
一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 NOS ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體英文名稱:phospho-AKT1 (Tyr474) 0.1ml
一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 NO ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體英文名稱:phospho-AKT1 (Ser473 + Tyr474) 0.1ml
葉酸受體α(FOLR1)ELISA試劑盒 FOLR1 ELISA Kit ASH1L蛋白抗體英文名稱:ASH1L 0.2ml
葉酸受體(FOLR)ELISA試劑盒 FOLR ELISA Kit α2C-AR腎上腺素能受體抗體英文名稱:ADRA2C 0.2ml
葉酸(FA)ELISA試劑盒 FA ELISA Kit 中心體蛋白AZI1抗體英文名稱:AZI1 0.2ml
氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA試劑盒 GSSG ELISA Kit α蛋白激酶3抗體(心?。┯⑽拿Q:ALPK3 0.2ml
氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 OxLDL ELISA Kit 表皮型脂氧合酶3抗體(魚鱗病相關(guān)蛋白)英文名稱:ALOXE3 0.2ml
氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)ELISA試劑盒 Ox-HDL ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)域28抗體英文名稱:ANKRD28 0.2ml
氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 OLAb ELISA Kit 細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體英文名稱:AFF4 0.2ml
氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 OxLDL ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體英文名稱:ANKRD12 0.2ml
氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)ELISA試劑盒 PRDX4 ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體英文名稱:ANKRD13A 0.2ml
延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒 EloA ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體英文名稱:ANKRD9 0.2ml
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)ELISA試劑盒 NAD ELISA Kit 脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體英文名稱:APM2 0.2ml
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 NADPH ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體英文名稱:ANKS1A 0.2ml
50T流感病毒H12亞型PCR檢測試劑盒丹參素 Danshensu 76822-21-4 20mg
二氫丹參酮Ⅰ Dihydrotanshinone I 87205-99-0 20mg
隱丹參酮 Cryptotanshinone 35825-57-1 20mg
丹參新酮 Miltirone 27210-57-7 5mg
丹酚酸A Salvianolic acid A 96574-01-5 20mg
丹酚酸B Salvianolic acid B 115939-25-8 20mg
丹酚酸C Salvianolicacid C 115841-09-3 20mg
丹酚酸D Salvianolicacid D 142998-47-8 10mg
紫草酸 Lithospermic acid 28831-65-4 20mg
地膚子皂苷Ic Momordin Ic 96990-18-0 20mg
大豆苷 Daidzin 552-66-9 20mg
大豆苷元 Daidzein 486-66-8 20mg
黃豆黃苷 Glycitin 40246-10-4 20mg
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。