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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
50T副流感病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63300 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 i-PTH ELISA Kit 白細(xì)胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體英文名稱:BAT5 0.2ml
去乙酰化酶Sirtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA試劑盒 SIRT7/SIR2L7 ELISA Kit BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1(丙型肝炎病毒的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8)抗體英文名稱:BTBD1 0.2ml
去乙?;?/span>Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA試劑盒 SIRT6/SIR2L6 ELISA Kit BCL7B蛋白抗體英文名稱:BCL7B 0.2ml
去乙?;?/span>Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA試劑盒 SIRT5/SIR2L5 ELISA Kit 堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體英文名稱:BNC2 0.2ml
去乙酰化酶Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA試劑盒 SIRT4/SIR2L4 ELISA Kit B細(xì)胞白血病/瘤蛋白7抗體英文名稱:BCL7C 0.2ml
去乙?;?/span>Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒 SIRT2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit 先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)英文名稱:BSCL2 0.2ml
去乙酰化酶Sirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA試劑盒 SIRT1/SIR2L1 ELISA Kit B細(xì)胞遷移基因1抗體英文名稱:BTG1 0.2ml
去乙?;囸I(dGHRL)ELISA試劑盒 dGHRL ELISA Kit 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體英文名稱:BEAN1 0.2ml
去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒 ASGPR ELISA Kit B7H6蛋白抗體英文名稱:B7-H6 0.2ml
去唾液酸糖蛋白受體(AGSPR)ELISA試劑盒 AGSPR ELISA Kit B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體英文名稱:BOb-1 0.1ml
去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒 NE ELISA Kit 橋連整合因子蛋白抗體英文名稱:BIN1 0.1ml
去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒 NA ELISA Kit BADH2抗體(水稻)英文名稱:BADH2 1ml
去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒 dDAVP ELISA Kit 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體英文名稱:BCHE(1E8) 0.2ml
趨化因子配體17(CXCL17)ELISA試劑盒 CXCL17 ELISA Kit β-乳球蛋白抗體英文名稱:Beta-lactoglobulin 0.2ml
趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒 CCR3 ELISA Kit 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體英文名稱:phospho-beta catenin (Tyr142) 0.1ml
50T副流感病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒石斛堿 Dendrobine 2115-91-5 10mg
水飛薊賓 Silibinin 22888-70-6 20mg
異水飛薊賓 Isosilybin 72581-71-6 10mg
石吊蘭素 Lysionotin 152743-19-6 20mg
麝香酮 3-Methylcyclopentadecanone 541-91-3 20mg
酮麝香 Musk ketone 81-14-1 20mg
桑辛素 Morusin 62596-29-6 20mg
桑色素 Morin 480-16-0 20mg
桑皮苷A mulberroside A 102841-42-9 20mg
桑皮苷C Mulberroside C 102841-43-0 20mg
桑根酮 C Sanggenon C 80651-76-9 20mg
桑根酮 D Sanggenon D 81422-93-7 20mg
D-松醇 D-Pinitol 10284-63-6 20mg