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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:50T脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):BH-P63404
  • 產(chǎn)品**:博湖
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
50T脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
詳情介紹:

它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

50T脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒

50T

BH-P63404

實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
對(duì)氧磷酶-3(PON3)ELISA試劑盒  PON3 ELISA Kit  原癌基因CD39樣蛋白4抗體英文名稱:CD39L4 0.2ml

對(duì)氧磷酶(PON)ELISA試劑盒  PON ELISA Kit  膠原樣蛋白抗體英文名稱:COL20A1 0.2ml

對(duì)稱二甲基精氨酸(SMDA)ELISA試劑盒  SMDA ELISA Kit  易感性候選基因5抗體英文名稱:CASC5 0.2ml

對(duì)氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒  PABA ELISA Kit  鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體英文名稱:CAMKK2 0.1ml

端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)ELISA試劑盒  TERF2 ELISA Kit  中心體肌動(dòng)蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體英文名稱:Centaurin gamma 1 0.2ml

端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)ELISA試劑盒  TERF1 ELISA Kit  細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體英文名稱:CDCA7L 0.2ml

端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)ELISA試劑盒  TERT ELISA Kit  半胱胺酸蛋白酶-2抗體英文名稱:Caspase 2 0.1ml

端粒酶(TE)ELISA試劑盒  TE ELISA Kit  7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體英文名稱:C7orf63 0.2ml

端粒保護(hù)蛋白1(POT1)ELISA試劑盒  POT1 ELISA Kit  CD2結(jié)合蛋白3抗體英文名稱:CD2BP3 0.2ml

毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒  M-AChR M3 ELISA Kit  膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體英文名稱:CTHRC1 0.2ml

毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒  M-AChR ELISA Kit  20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體英文名稱:c20orf72 0.2ml

毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒  TSST-1 ELISA Kit  2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框6抗體英文名稱:C2orf6 0.2ml

疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒  AZT ELISA Kit  CD318抗體英文名稱:CDCP1 0.2ml

凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA試劑盒  BIRC4/API3 ELISA Kit  1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框111抗體英文名稱:C1ORF111 0.2ml

凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒  AIF ELISA Kit  著絲粒蛋白B抗體英文名稱:CENPB 0.2ml

50T脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒250次 植物RNAout Plant RNAOUT 4℃保存

50次 柱式植物RNAout Column Plant RNAOUT 4℃保存

50次 柱式植物RNAout 2.0 Column Plant RNAOUT 2.0 4℃保存(DNase需要-20℃保存)

5次 大提柱式植物RNAout Maxi Column Plant RNAOUT 4℃保存

50次 柱式植物RNA-DNA雙提試劑盒  

50次 柱式藻類RNAout Column Algal RNAOUT 4℃保存

5次 大提柱式藻類RNAout  

50次 土壤RNAout Soil RNAOUT 4℃保存

50次 柱式土壤RNAout Column Soil RNAOUT 4℃保存

50次 RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存

250次 RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存

50次 白色RNAout  

50次 柱式RNAout Column Fungal RNAOUT 4℃保存

 


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