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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:50T霍亂弧菌O139群PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):BH-P63446
  • 產(chǎn)品**:博湖
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
50T霍亂弧菌O139群PCR檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
詳情介紹:

它具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

50T霍亂弧菌O139群PCR檢測(cè)試劑盒

50T

BH-P63446

實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒  IFI16/p16 ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框122抗體英文名稱:C1orf122  0.2ml

γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒  MIGF/CXCL9 ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框123抗體英文名稱:C1orf123 0.2ml

γ干擾素受體(IFN-γR)ELISA試劑盒  IFN-γR ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框124抗體英文名稱:C1orf124 0.2ml

γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒  IFN-γ ELISA Kit  2號(hào)染色體開放閱讀框3抗體英文名稱:C2orf3  0.2ml

γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒  IFNγ ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框127抗體英文名稱:C1orf127 0.2ml

γ分泌素激活蛋白(PION)ELISA試劑盒  PION ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框129抗體英文名稱:C1orf129 0.2ml

γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒  GABA ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框130抗體英文名稱:C1orf130 0.2ml

β-轉(zhuǎn)導(dǎo)素重復(fù)序列包含蛋白(BTRC)ELISA試劑盒  BTRC ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框131抗體英文名稱:C1orf131 0.2ml

β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒  ARRB2 ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框135抗體英文名稱:C1orf135 0.2ml

β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒  β-TG ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框141抗體英文名稱:C1orf141 0.2ml

β血小板球蛋白(β-TG)ELISA試劑盒  β-TG ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框144抗體英文名稱:C1orf144 0.2ml

β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒  BTC ELISA Kit  COPA蛋白抗體英文名稱:alpha COP I 0.2ml

β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒  BACE2 ELISA Kit  1號(hào)染色體開放閱讀框185抗體英文名稱:C1orf185 0.2ml

β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA試劑盒  MSMB/PRSP ELISA Kit  磷酸化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體英文名稱:phospho-alpha B Crystallin (Ser45) 0.1ml

β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒  BACE1 ELISA Kit  磷酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體英文名稱:phospho-alpha B Crystallin (Ser19) 0.1ml

50T霍亂弧菌O139群PCR檢測(cè)試劑盒100mL DNA級(jí)Tris HCl,1M,pH7.0  

100mL DNA級(jí)Tris HCl,1M,pH7.5  

100mL DNA級(jí)Tris HCl,1M,pH8.0  

100mL DNA級(jí)Tris HCl,1M,pH8.5  

100mL DNA級(jí)Tris HCl,1M,pH9.0  

100g DNA級(jí)CTAB(十六烷基溴化銨)  

10g DNA級(jí)DTT(二硫代蘇糖醇)  

100g DNA級(jí) EDTA 2Na  

100g DNA級(jí)Guanidine HCl(鹽酸胍)  

100g DNA級(jí)GuSCN(異硫酸胍)  

50mL DNA級(jí)2-Mercaptoethanol(2)  

100g DNA級(jí)PVP K30(聚乙烯基吡咯烷酮K30)  

100g DNA級(jí)Sarkosyl(十二烷基肌氨酸鈉)179  

 


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