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注意事項:
服務流程:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
50T霍亂弧菌CTX基因PCR檢測試劑盒
50T
BH-P63448
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
方法
β-黑色素細胞刺(β-MSH)ELISA試劑盒 β-MSH ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框198抗體英文名稱:C1orf198 0.2ml
β黑色素細胞刺(β-MSH)ELISA試劑盒 β-MSH ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框21抗體英文名稱:C1orf21 0.2ml
β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 IFN-β/IFNB ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框216抗體英文名稱:C1orf216 0.2ml
β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 β Manase ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框43抗體英文名稱:C1orf43 0.2ml
β-防御素3(β-BD-3)ELISA試劑盒 β-BD-3 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框50抗體英文名稱:C1orf50 0.2ml
β-防御素2(β-BD-2)ELISA試劑盒 β-BD-2 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框49抗體英文名稱:C1orf49 0.2ml
β防御素2(β-BD-2)ELISA試劑盒 β-BD-2 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框53抗體英文名稱:C1orf53 0.2ml
β防御素104(DEFB104A)ELISA試劑盒 DEFB104A ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框54抗體英文名稱:C1orf54 0.2ml
β防御素1(DEFB1)ELISA試劑盒 DEFB1 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框55抗體英文名稱:C1orf55 0.2ml
β防御素(β-Defensin)ELISA試劑盒 β-Defensin ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框56抗體英文名稱:C1orf56 0.2ml
β淀粉樣前體蛋白(β-APP)ELISA試劑盒 β-APP ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框65抗體英文名稱:C1orf65 0.2ml
β淀粉樣多肽42(Aβ 42)ELISA試劑盒 Aβ 42 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框64抗體英文名稱:C1orf64 0.2ml
β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)ELISA試劑盒 Aβ25-35 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框77抗體英文名稱:C1orf77 0.2ml
β淀粉樣多肽42(ABeta 42)ELISA試劑盒 ABeta 42 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框69抗體英文名稱:C1orf69 0.2ml
50T霍亂弧菌CTX基因PCR檢測試劑盒250mL TBE電泳液,10× TBE Buffer, 10× 常溫
2500mL TBE電泳液,10× TBE Buffer, 10× 常溫
250mL 堿性膠電泳液,10× Alkaline Gel Buffer, 10× 常溫
100mL RNA電泳液,10× RNARUN Buffer, 10× 常溫
250mL RNA電泳液,10× RNARUN Buffer, 10× 常溫
10mL DNA上樣液 (紅色),6× DNAON 4℃保存
10mL DNA上樣液 (藍色),6× DNAON 4℃保存
10mL DNA上樣液 (紅色),6×(非甘油) DNAON 4℃保存
10mL DNA上樣液 (藍色),6×(非甘油) DNAON 4℃保存
1.5mL 三合一RNA上樣液 (含EB) RNAON -20℃保存
1.5mL 三合一RNA上樣液 (無EB) RNAON -20℃保存
1.5mL DNA堿性膠上樣液,6× DNAoN for Alkaline Gel -20℃保存
10mL DNA堿性膠上樣液,6× DNAoN for Alkaline Gel -20℃保存
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
β-肌動蛋白(β-actin)ELISA試劑盒 β-actin ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框194抗體英文名稱:C1orf194 0.2ml