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原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T副溶血弧菌TLH/ TDH /TRH基因PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P63455
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒 SDC1 ELISA Kit 緊密連接蛋白8抗體英文名稱:Claudin 8 0.2ml
STEAP家族成員4(Steap4)ELISA試劑盒 Steap4 ELISA Kit 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體英文名稱:Phospho-Caspase-9 (Ser196) 0.1ml
STEAP家族成員1(Steap1)ELISA試劑盒 Steap1 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體英文名稱:phospho-Cdc25B (Ser353) 0.1ml
Stathmin 1(STMN1)ELISA試劑盒 STMN1 ELISA Kit 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體英文名稱:phospho-CDKN1B (Thr157) 0.1ml
STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA試劑盒 PIAS3 ELISA Kit 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體英文名稱:phospho-CDKN1B (Thr187) 0.1ml
SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2(SMOC2)ELISA試劑盒 SMOC2 ELISA Kit 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體英文名稱:phospho-CDKN1B (Ser178) 0.1ml
SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白1(SMOC1)ELISA試劑盒 SMOC1 ELISA Kit 磷酸化p21蛋白抗體英文名稱:phospho-CDKN1A (Thr145) 0.1ml
SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)ELISA試劑盒 SHC1 ELISA Kit 磷酸化p21蛋白抗體英文名稱:phospho-CDKN1A (Thr57) 0.1ml
SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 SHC/SLP-76 ELISA Kit 8號染色體開放閱讀框84抗體英文名稱:c8orf84 0.2ml
Salusin Beta(Salusin β)ELISA試劑盒 Salusin β ELISA Kit 磷酸化p21蛋白抗體英文名稱:phospho-CDKN1A (Ser146) 0.1ml
Salusin Alpha(Salusin α)ELISA試劑盒 Salusin α ELISA Kit 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體英文名稱:Phospho-CEBP alpha (Ser21) 0.1ml
SAALDL復(fù)合物(SAALDL)ELISA試劑盒 SAALDL ELISA Kit CLEC2D蛋白抗體英文名稱:CLEC2D 0.1ml
S100鈣結(jié)合蛋白P(S100P)ELISA試劑盒 S100P ELISA Kit 富含半胱氨酸與表皮生長因子樣蛋白2抗體英文名稱:CRELD2 0.2ml
S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒 S100A8 ELISA Kit 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體英文名稱:COMMD9 0.2ml
S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒 S100A9 ELISA Kit 醌氧化還原酶樣蛋白1抗體英文名稱:CRYZL1 0.2ml
50T副溶血弧菌TLH/ TDH /TRH基因PCR檢測試劑盒50次 柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒 Column miRNABACK 4℃保存
100g 瓊脂糖 Agarose 常溫
2.5g 低熔點(diǎn)瓊脂糖 Low Melting Agarose 常溫
5g 低熔點(diǎn)瓊脂糖 Low Melting Agarose 常溫
200mL 電泳級丙烯酰胺溶液(干粉型) Acrylamide Solution(19:1Po`wder),EG 常溫
25g 電泳級甲叉雙丙烯酰胺 Bis-Acrylamide,EG 常溫,防潮
1.5mL 電泳級TEMED TEMED,EG 4℃保存(長期保存可放-20℃)、避光
0.1g×10 電泳級過硫酸銨 Ammonium Persulfate,EG 常溫,防潮
100g 電泳級尿素 Urea,EG 常溫
100g 電泳級MOPS MOPS,EG 常溫
50mL 剝離硅烷 Repeling Silane 常溫
25mL 親和硅烷 Binding Silane 常溫
100mL 電泳級甘油 Glycerol,EG 常溫
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。