咨詢(xún)電話:18117197628
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
50T腸致病性大腸桿菌(EPEC)PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63466 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒 CXCR3 ELISA Kit 細(xì)胞間粘附分子-1抗體英文名稱(chēng):ICAM1 0.1ml
CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒 CXCR1 ELISA Kit 細(xì)胞間粘附分子-1抗體英文名稱(chēng):ICAM1 0.1ml
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 CXCL16 ELISA Kit 細(xì)胞間粘附分子-1抗體英文名稱(chēng):ICAM1 0.1ml
CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒 CX3CR1 ELISA Kit 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIF抗體英文名稱(chēng):Cyclophilin F 0.2ml
COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)ELISA試劑盒 COPS2 ELISA Kit 過(guò)氧化氫酶抗體英文名稱(chēng):Catalase 0.2ml
c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒 c-myc ELISA Kit 細(xì)胞內(nèi)氯離子通道蛋白4抗體英文名稱(chēng):CLIC4 0.1ml
c-Jun氨基末端激酶/應(yīng)急激活的蛋白酶(JNK/SAPK)ELISA試劑盒 JNK/SAPK ELISA Kit 細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)控蛋白19/環(huán)指蛋白197抗體英文名稱(chēng):CGR19 0.2ml
CDCP1(CDCP1)ELISA試劑盒 CDCP1 ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體英文名稱(chēng):CCDC139 0.2ml
CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 CD8 ELISA Kit 染色體修飾蛋白1抗體(金屬蛋白酶1)英文名稱(chēng):CHMP1A 0.2ml
CD82分子(CD82)ELISA試劑盒 CD82 ELISA Kit 鈣依賴(lài)分泌激活蛋白1抗體英文名稱(chēng):CAPS1 0.2ml
CD73分子(CD73)ELISA試劑盒 CD73 ELISA Kit 小腦肽1抗體英文名稱(chēng):CBLN1 0.2ml
CD6分子(CD6)ELISA試劑盒 CD6 ELISA Kit 小腦肽2抗體英文名稱(chēng):CBLN2 0.2ml
CD68分子(CD68)ELISA試劑盒 CD68 ELISA Kit 小腦肽4抗體英文名稱(chēng):CBLN4 0.2ml
CD5分子樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 CD5L ELISA Kit 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體英文名稱(chēng):CELSR2 0.1ml
CD63分子(CD63)ELISA試劑盒 CD63 ELISA Kit 腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體英文名稱(chēng):CCM2 0.2ml
50T腸致病性大腸桿菌(EPEC)PCR檢測(cè)試劑盒5mL 甲酰胺,PCR級(jí) Formamide,PCR Grade -20℃保存
5mL MgSO4溶液,10mM,PCR級(jí) MgSO4 ,PCR Grade -20℃保存
10mL 石蠟油,PCR級(jí) Paraffin,PCR Grade 常溫
1.5mL DMSO,PCR級(jí) DMSO,PCR Grade 常溫
1.5mL 海藻糖溶液, 1.5M,PCR級(jí) Trehalose Solution,PCR Grade 4℃保存
1.5mL 甜菜堿溶液,5M,PCR級(jí) Betaine Solution, PCR Grade 4℃保存
0.1mL 綠如藍(lán)染料,PCR級(jí) DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存
1mL 綠如藍(lán)染料,PCR級(jí) DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存
0.5mL dNTP溶液,10 mM dNTP Solution,10 mM -20℃保存
5mL dNTP溶液,10 mM dNTP Solution,10 mM -20℃保存
0.5mL dNTP溶液,2.5 mM dNTP Solution,2.5 mM -20℃保存
5mL dNTP溶液,2.5 mM dNTP Solution,2.5 mM -20℃保存
0.5mL dNTP溶液,100 mM dNTP Solution,100 mM -20℃保存