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原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T腸出血性大腸桿菌 O104:H4 PCR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):BH-P63473
規(guī)格:50T
分類:熒光 PCR 法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
CD146分子(CD146)ELISA試劑盒 CD146 ELISA Kit 結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體英文名稱:CITED1 0.2ml
CD134分子(CD134)ELISA試劑盒 CD134 ELISA Kit Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體英文名稱:Collagen II 0.1ml
CD117分子(CD117)ELISA試劑盒 CD117 ELISA Kit CSMD2蛋白抗體英文名稱:CSMD2 0.2ml
CD10分子(CD10)ELISA試劑盒 CD10 ELISA Kit CSMD3蛋白抗體英文名稱:CSMD3 0.2ml
CC趨化因子受體7(CCR7)ELISA試劑盒 CCR7 ELISA Kit 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶CSTP1抗體英文名稱:CSTP1 0.2ml
CC趨化因子受體5(CCR5)ELISA試劑盒 CCR5 ELISA Kit CTAGE6蛋白抗體英文名稱:CTAGE6 0.2ml
CC趨化因子受體2(CCR2)ELISA試劑盒 CCR2 ELISA Kit 皮膚T細(xì)胞瘤相關(guān)抗原4抗體英文名稱:CTAGE4 0.2ml
CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 CCR1 ELISA Kit 膜蛋白CLDND2抗體英文名稱:CLDND2 0.2ml
CC趨化因子7(CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)ELISA試劑盒 CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7 ELISA Kit 含半胱氨酸和組氨酸豐富域蛋白1抗體英文名稱:CHORDC1 0.2ml
CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)ELISA試劑盒 CCL5/D17S136E/SCYA5 ELISA Kit 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白英文名稱:capsid protein 0.2ml
CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒 C/EBPε ELISA Kit 肽CAMP抗體英文名稱:Cathelicidin 0.1ml
CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒 C/EBPδ ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體英文名稱:CCDC134 0.2ml
CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 C/EBPα ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體英文名稱:CCDC69 0.2ml
Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)ELISA試劑盒 KCNN2 ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體英文名稱:CCDC70 0.2ml
cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 CREB ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體英文名稱:CCDC98 0.2ml
50T腸出血性大腸桿菌 O104:H4 PCR檢測(cè)試劑盒40uL×4 雙脫氧dNTP溶液(10mM) ddNTP Solution -20℃保存
100次 dNTP和引物**劑 dNTP-Primer Erasol -20℃保存
10mL PCR Mix染料 PCR Mix Dye -20℃保存
0.3mL 可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑 Taq DNA Polymerase Inhibitor -20℃保存
500U Taq酶抗體 Taq Antibody -20℃保存
30次 DNA 修復(fù)混合液 DNA Repair Mix -20℃保存
150次 DNA 修復(fù)混合液 DNA Repair Mix -20℃保存
100次 即用型PCR試劑盒2.0 Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存
600次 即用型PCR試劑盒2.0 Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存
0.5mL 探針標(biāo)記專用PCR Mix
1mL 2X PCR Mix(即用型PCR試劑盒3.0) Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存
9 mL 2X PCR Mix(即用型PCR試劑盒3.0) Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存
1.5mL 2X HotStart PCR Mix(即用型熱啟動(dòng)PCR試劑盒) Instant Hotstart PCR Mix -20℃保存
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。