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原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T白蛉熱托斯卡納病毒PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P63579
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)ELISA試劑盒 IGFBP3 ELISA Kit 羧肽酶CPN2抗體英文名稱:CPN2 0.2ml
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)ELISA試劑盒 IGFBP1 ELISA Kit 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2D(CaMKIIδ)英文名稱:CAMK2D 0.2ml
胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)ELISA試劑盒 IGF2R ELISA Kit 胞漿-5′-核苷酸酶-Ⅱ抗體英文名稱:NT5C2 0.1ml
胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)ELISA試劑盒 IGF2BP3 ELISA Kit CD86抗體英文名稱:CD86 0.1ml
胰島素樣生長因子2(IGF2)ELISA試劑盒 IGF2 ELISA Kit 周期素依賴性激酶1抗體英文名稱:CDK1 0.1ml
胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)ELISA試劑盒 IGF1R ELISA Kit 周期素依賴性激酶2抗體英文名稱:CDK2 0.1ml
胰島素樣生長因子1(IGF1)ELISA試劑盒 IGF1 ELISA Kit 周期素依賴性激酶4抗體英文名稱:CDK4 0.1ml
胰島素樣蛋白5(INSL5)ELISA試劑盒 INSL5 ELISA Kit 周期素依賴性激酶5抗體英文名稱:CDK5 0.1ml
胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒 INSL3 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框200抗體英文名稱:C1orf200 0.2ml
胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒 ISR ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框223抗體英文名稱:c6orf223 0.2ml
胰蛋白酶X3(TRYX3)ELISA試劑盒 TRYX3 ELISA Kit 纖維素酶抗體英文名稱:cellulase 1ml
胰蛋白(PANCPIN)ELISA試劑盒 PANCPIN ELISA Kit C型凝集素4家族E抗體英文名稱:CLEC 4E 0.1ml
胰彈性蛋白酶(ELA1)ELISA試劑盒 ELA1 ELISA Kit 毒蕈堿型乙酰膽堿受體抗體英文名稱:ChRM2 0.1ml
伊默素(EMD)ELISA試劑盒 EMD ELISA Kit 促進(jìn)凋亡基因抗體英文名稱:CIDEB 0.2ml
胰安肽(Aglycin)ELISA試劑盒 Aglycin ELISA Kit 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2抗體英文名稱:ChRM2 0.1ml
50T白蛉熱托斯卡納病毒PCR檢測試劑盒1張 硝酸纖維素膜,13×20 cm (Amersham) Nitrocellulose Membrane 常溫保存
1張 尼龍膜,13×20 cm Nylon Membrane (Pharmacia) 常溫保存
1張 PVDF膜,0.45 μm,13×20 cm PVDF Membrane (Millipore) 常溫保存
250mL 氨基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain 避光保存
250mL 麗春紅S染膜液 Ponceau S BlotStain 避光保存
20L 濕法電轉(zhuǎn)液(干粉) Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
20L 半干法電轉(zhuǎn)液(干粉) Half-Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
100mL Western印跡膜封膜液(尼龍膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
100mL Western印跡膜封膜液 (NC膜和PVDF膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
100mL 印跡膜抗體稀釋液 Antibody Dilution Buffer 4℃保存
50mL Western印跡膜抗體劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存
200mL Western印跡膜抗體劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存
250mL Western印跡膜洗膜液
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。