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服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
50T漢灘病毒和漢城病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63620 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1(ERK1)ELISA試劑盒 ERK1 ELISA Kit 雙氧化酶1/甲狀腺氧化酶1抗體英文名稱:DUOX1 0.2ml
細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)ELISA試劑盒 EMMPRIN ELISA Kit 雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2抗體英文名稱:DUOX2 0.2ml
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)ELISA試劑盒 ECM1 ELISA Kit 雙氧化酶成熟因子抗體英文名稱:DUOXA1 0.2ml
細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)ELISA試劑盒 CPR ELISA Kit 胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體英文名稱:DOCK7 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員7A1(CYP7A1)ELISA試劑盒 CYP7A1 ELISA Kit DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體英文名稱:DDIT4L 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)ELISA試劑盒 CYP3A4 ELISA Kit 死亡相關(guān)蛋白3抗體英文名稱:DAP3 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員2E1(CYP2E1)ELISA試劑盒 CYP2E1 ELISA Kit 防御素α6抗體英文名稱:Defensin alpha 6 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒 CYP26A1 ELISA Kit S期激酶活化蛋白DBF4B抗體英文名稱:DBF4B 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員24A1(CYP24A1)ELISA試劑盒 CYP24A1 ELISA Kit 脫氧胞苷激酶抗體英文名稱:DCK 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員21B(CYP21B)ELISA試劑盒 CYP21B ELISA Kit 短鏈脫氫還原酶3抗體英文名稱:DHRS3 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)ELISA試劑盒 CYP1B1 ELISA Kit DNA聚合酶θ/DNA pol θ抗體英文名稱:DNA Polymerase theta/POLH 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)ELISA試劑盒 CYP1A2 ELISA Kit DENN域內(nèi)含蛋白2D抗體英文名稱:DENND2D 0.2ml
細(xì)胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)ELISA試劑盒 CYP1A1 ELISA Kit 肌萎縮相關(guān)蛋白DAG1抗體英文名稱:Alpha Dystroglycan 0.1ml
細(xì)胞色素C1(CYC1)ELISA試劑盒 CYC1 ELISA Kit 磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體英文名稱:phospho-DAAM1 (Thr361) 0.1ml
細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)ELISA試劑盒 COX4I1 ELISA Kit 磷酸化肌萎縮相關(guān)蛋白DAG1抗體英文名稱:phospho-DAG1 (Tyr892) 0.1ml
50T漢灘病毒和漢城病毒PCR檢測(cè)試劑盒15次 動(dòng)物線粒體純化試劑盒 Animal Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 動(dòng)物線粒體純化試劑盒 Animal Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 植物線粒體純化試劑盒 Plant Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 植物線粒體純化試劑盒 Plant Mitochondria Purification Kit 常溫保存
15次 植物葉綠體純化試劑盒 Plant Chloroplast Purification Kit 4℃保存
1mL 超快轉(zhuǎn)染試劑盒 Rapid Transfection Reagent 2-8℃保存
100次 阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測(cè)試劑 Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity -20℃避光保存
500次 阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測(cè)試劑 Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity -20℃避光保存
500次 MTT檢測(cè)試劑盒 MTT Assay Kit -20℃保存
5mL CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒 Cell Counting Kit-8 4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效
100次 WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
10次 一站式生物素檢測(cè)TUNEL試劑盒(DAB法) One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit -20℃保存
10次 一站式生物素TUNEL試劑盒(FITC/POD)
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。