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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
50T立克次體PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63666 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
糖蛋白Ⅴ(GP5)ELISA試劑盒 GP5 ELISA Kit 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫酶抗體英文名稱:ETFDH 0.2ml
羰基還原酶4(CBR4)ELISA試劑盒 CBR4 ELISA Kit EGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體英文名稱:ETL 0.2ml
羰基還原酶3(CBR3)ELISA試劑盒 CBR3 ELISA Kit 乙醇胺激酶2抗體英文名稱:ETNK2 0.2ml
羰基還原酶1(CBR1)ELISA試劑盒 CBR1 ELISA Kit 磷酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體英文名稱:phospho-ETS1 (Thr38) 0.1ml
碳酸酐酶Ⅻ(CA12)ELISA試劑盒 CA12 ELISA Kit 磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體英文名稱:phospho-ECT2 (Ser370) 0.1ml
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)ELISA試劑盒 CA9 ELISA Kit 嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶抗體英文名稱:EPX 0.2ml
碳酸酐酶Ⅵ(CA6)ELISA試劑盒 CA6 ELISA Kit 核酸內(nèi)切酶G抗體英文名稱:Endo G 0.1ml
碳酸酐酶ⅤB(CA5B)ELISA試劑盒 CA5B ELISA Kit 酪氨酸蛋白激酶受體A10抗體英文名稱:EPHA10 0.1ml
碳酸酐酶Ⅳ(CA4)ELISA試劑盒 CA4 ELISA Kit 胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體英文名稱:EXOC2 0.2ml
碳酸酐酶Ⅲ(CA3)ELISA試劑盒 CA3 ELISA Kit 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體英文名稱:phospho-eIF4EBP1 (Thr37 + Thr46) 0.1ml
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)ELISA試劑盒 CA2 ELISA Kit 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體英文名稱:phospho-ERK1/2 (Thr202 + Tyr204) 0.1ml
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA試劑盒 CA1 ELISA Kit 泛素交聯(lián)酶抗體英文名稱:E2EPF 0.2ml
碳分解代謝物阻遏4樣蛋白(CCRN4L)ELISA試劑盒 CCRN4L ELISA Kit EB病毒核抗原-3B抗體英文名稱:EBNA 3B 0.2ml
肽酰甘氨酸α酰胺化單氧酶(PAM)ELISA試劑盒 PAM ELISA Kit 乙?;D(zhuǎn)移酶EID1抗體英文名稱:EID1 0.2ml
炭疽熱受體2(ANTXR2)ELISA試劑盒 ANTXR2 ELISA Kit 磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體英文名稱:phospho-Eg5(Thr926) 0.1ml
50T立克次體PCR檢測(cè)試劑盒250mg 胃蛋白酶 Pepsin 4℃保存
100U PreScissiom 蛋白酶 PreScissiom Protease -20℃保存
5μg SUMO 蛋白酶 SUMO Protease -20℃保存
100μg 葡激酶 Staphylokinase -20℃保存
100μg 鏈激酶 Streptokinase -20℃保存
300U TEV蛋白酶 TEV Protease -20℃保存
1000U 凝血酶 Thrombin -70℃保存
25mg 嗜熱蛋白酶 Thermolysin -20℃保存
100μg 胰蛋白酶,質(zhì)譜級(jí) Trypsin,MS Grade -20℃保存
1mg 二硫鍵異構(gòu)酶,人 Disulfide Isomerase -70℃保存
10ku 超氧化物歧化酶,人 Superoxide Dismutase -20℃保存
100U β-瓊脂糖酶Ⅰ β-AgaraseⅠ -20℃保存
500U β-瓊脂糖酶Ⅰ