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注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T豬鏈球菌通用型和2型PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63766 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
晶狀體蛋白ζ(CRYζ)ELISA試劑盒 CRYζ ELISA Kit GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體英文名稱:GCNT1 0.2ml
晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒 CRYαB ELISA Kit 胰島素樣生長因子1受體相互作用蛋白1抗體英文名稱:GIPC1 0.2ml
緊密連接蛋白1(TJP1)ELISA試劑盒 TJP1 ELISA Kit 鳥苷酸環(huán)化酶α1/GCS-α-1抗體英文名稱:Guanylyl Cyclase alpha 1 0.1ml
金屬硫蛋白4(MT4)ELISA試劑盒 MT4 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體125抗體英文名稱:GPR125 0.2ml
金屬硫蛋白3(MT3)ELISA試劑盒 MT3 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體84抗體英文名稱:GPR84 0.1ml
金屬硫蛋白1X(MT1X)ELISA試劑盒 MT1X ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體G2A抗體英文名稱:GPCR G2A 0.1ml
金屬硫蛋白1M(MT1M)ELISA試劑盒 MT1M ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體1抗體英文名稱:GPR1 0.2ml
金屬硫蛋白1L(MT1L)ELISA試劑盒 MT1L ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體100抗體英文名稱:GPR100 0.2ml
金屬硫蛋白1H(MT1H)ELISA試劑盒 MT1H ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體101抗體英文名稱:GPR101 0.2ml
金屬硫蛋白1G(MT1G)ELISA試劑盒 MT1G ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體103抗體英文名稱:GPR103 0.2ml
金屬硫蛋白1F(MT1F)ELISA試劑盒 MT1F ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體110抗體英文名稱:GPR110 0.2ml
金屬硫蛋白1E(MT1E)ELISA試劑盒 MT1E ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體12抗體英文名稱:GPR12 0.2ml
金屬硫蛋白1B(MT1B)ELISA試劑盒 MT1B ELISA Kit 血管內(nèi)皮標(biāo)志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體英文名稱:GPR124 0.2ml
金屬磷酸酯酶1(MPPE1)ELISA試劑盒 MPPE1 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體128抗體英文名稱:GPR128 0.2ml
金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒 MT1 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體58抗體英文名稱:GPR58 0.2ml
50T豬鏈球菌通用型和2型PCR檢測試劑盒1瓶 L7912細胞株 L7912 低溫運輸和保存
1瓶 L929細胞株 L929 低溫運輸和保存
1瓶 LA795(上皮樣)細胞株 LA795(上皮樣) 低溫運輸和保存
1瓶 LA795(實體瘤)細胞株 LA795(實體瘤) 低溫運輸和保存
1瓶 Lec1細胞株 Lec1 低溫運輸和保存
1瓶 Li-7細胞株 Li-7 低溫運輸和保存
1瓶 LII細胞株 LII 低溫運輸和保存
1瓶 LL/2(LLC1)細胞株 LL/2(LLC1) 低溫運輸和保存
1瓶 LLC-MK2細胞株 LLC-MK2 低溫運輸和保存
1瓶 LLC-PK1細胞株 LLC-PK1 低溫運輸和保存
1瓶 LLC細胞株 LLC 低溫運輸和保存
1瓶 LNcap cloneFGC(GFP)細胞株 LNcap cloneFGC(GFP) 低溫運輸和保存
1瓶 LNcap cloneFGC細胞株 LNcap cloneFGC 低溫運輸和保存