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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T馬種特異性基因PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63808 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
核基質蛋白4(NMP4)ELISA試劑盒 NMP4 ELISA Kit 鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白2抗體英文名稱:GCAP2 0.2ml
核黃素轉運蛋白2(RFT2)ELISA試劑盒 RFT2 ELISA Kit 鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白3抗體英文名稱:GCAP3 0.2ml
核苷酸還原酶M1(RRM1)ELISA試劑盒 RRM1 ELISA Kit 氨基丙酮合成酶抗體英文名稱:GCAT 0.2ml
核苷磷酸化酶(NP)ELISA試劑盒 NP ELISA Kit 高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體英文名稱:GCC1 0.2ml
和肽素(CPP)ELISA試劑盒 CPP ELISA Kit 高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體英文名稱:GCC2 0.2ml
合子阻滯基因1(ZAR1)ELISA試劑盒 ZAR1 ELISA Kit 戊二酰輔酶A脫氫酶抗體英文名稱:GCDH 0.2ml
汗酸酶αL(IDUα)ELISA試劑盒 IDUα ELISA Kit GTP環(huán)反饋調節(jié)蛋白抗體英文名稱:GCHFR 0.2ml
含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)ELISA試劑盒 SOSTDC1 ELISA Kit 絨毛膜特異性轉錄因子GCM2抗體英文名稱:GCM2 0.2ml
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)ELISA試劑盒 vWA3A ELISA Kit 廣泛控制氨基酸合成1樣蛋白1抗體英文名稱:Gcn1l1 0.2ml
含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)ELISA試劑盒 vWA2 ELISA Kit β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶2抗體英文名稱:GCNT2 0.2ml
含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)ELISA試劑盒 vWA1 ELISA Kit 磷酸化G蛋白激活內向鉀通道1抗體英文名稱:phospho-GIRK1 (Ser185) 0.1ml
含溴區(qū)PHD指蛋白1(BRPF1)ELISA試劑盒 BRPF1 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白2抗體英文名稱:GIT2 0.2ml
含鋅飄帶域蛋白1(ZNRD1)ELISA試劑盒 ZNRD1 ELISA Kit 間隙連接蛋白10抗體英文名稱:GJA10 0.1ml
含鈀蛋白(PALLD)ELISA試劑盒 PALLD ELISA Kit 間隙連結蛋白50/白內障相關蛋白抗體英文名稱:GJA8 0.2ml
含纈酪肽蛋白(VCP)ELISA試劑盒 VCP ELISA Kit 間隙連結蛋白46/白內障相關蛋白抗體英文名稱:GJA3 0.2ml
50T馬種特異性基因PCR檢測試劑盒2 ug pcDNA3-YFP pcDNA3-YFP 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNAhis pcDNAhis 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA4/TO/Myc-His A pcDNA4/TO/Myc-His A 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA4/TO/Myc-His B pcDNA4/TO/Myc-His B 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA4/TO/Myc-His C pcDNA4/TO/Myc-His C 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA5 FRT pcDNA5 FRT 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA6 pcDNA6 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA6.2-GW EmGFP-miR pcDNA6.2-GW EmGFP-miR 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative control pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative control 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA6/TR pcDNA6/TR 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pcDNA6-Flag pcDNA6-Flag 低溫運輸,-20℃保存
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。