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注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T貉種特異性基因PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63812 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
歸巢關(guān)聯(lián)細胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒 HCAM ELISA Kit 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體英文名稱:phospho-GIT1(Tyr510) 0.1ml
胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒 CAD ELISA Kit 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1英文名稱:phospho-GIT1(Tyr554) 0.1ml
胱天蛋白酶9(CASP9)ELISA試劑盒 CASP9 ELISA Kit 葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體英文名稱:GKRP 0.2ml
胱天蛋白酶8(CASP8)ELISA試劑盒 CASP8 ELISA Kit GTP結(jié)合蛋白10抗體英文名稱:GTPBP10 0.2ml
胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA試劑盒 CASP7 ELISA Kit 磷酸化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體英文名稱:phospho-G3BP1(Ser232) 0.1ml
胱天蛋白酶6(CASP6)ELISA試劑盒 CASP6 ELISA Kit Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體英文名稱:G3BP1 0.1ml
胱天蛋白酶5(CASP5)ELISA試劑盒 CASP5 ELISA Kit γ氨基丁酸γ2受體/GABAA Rγ2抗體英文名稱:GABA A Receptor gamma 2 0.1ml
胱天蛋白酶4(CASP4)ELISA試劑盒 CASP4 ELISA Kit 磷酸化糖原合酶激酶3β抗體英文名稱:phospho-GSK-3 Beta(Ser21+Ser29) 0.1ml
胱天蛋白酶3(CASP3)ELISA試劑盒 CASP3 ELISA Kit 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體英文名稱:phospho-GIT1(Ser375) 0.1ml
胱天蛋白酶2(CASP2)ELISA試劑盒 CASP2 ELISA Kit 磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體英文名稱:phospho-GATA1(ser142) 0.1ml
胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA試劑盒 CASP14 ELISA Kit 磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體英文名稱:phospho-GATA1(ser310) 0.1ml
胱天蛋白酶12(CASP12)ELISA試劑盒 CASP12 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體英文名稱:GIT1 0.1ml
胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA試劑盒 CASP11 ELISA Kit 磷酸化GATA結(jié)合蛋白6抗體英文名稱:phospho-GATA6(Tyr271) 0.1ml
光導(dǎo)蛋白(PDC)ELISA試劑盒 PDC ELISA Kit 胰高血糖素受體抗體英文名稱:Glucagon Receptor 0.1ml
胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA試劑盒 CASP1 ELISA Kit 磷酸化γ氨基丁酸γ2受體/GABAA Rγ2抗體英文名稱:phospho-GABRG2(Ser327) 0.1ml
50T貉種特異性基因PCR檢測試劑盒 ug pCMV-HA pCMV-HA 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-HA-C pCMV-HA-C 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-hyPBase pCMV-hyPBase 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-HA-N pCMV-HA-N 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-LacI pCMV-LacI 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-MCS pCMV-MCS 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-Myc pCMV-Myc 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-Myc-C pCMV-Myc-C 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-Myc-N pCMV-Myc-N 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 ANXA6 pCMV-SPORT6 ANXA6 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 DNAJC7 pCMV-SPORT6 DNAJC7 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 DYX1C1 pCMV-SPORT6 DYX1C1 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 FLJ21908 pCMV-SPORT6 FLJ21908 低溫運輸,-20℃保存