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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:50T小反芻獸疫病毒(PPRV)PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):BH-P63934
  • 產(chǎn)品廠商:博湖
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
50T小反芻獸疫病毒(PPRV)PCR檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
詳情介紹:

它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

50T小反芻獸疫病毒(PPRV)PCR檢測(cè)試劑盒

50T

BH-P63934

實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
APEX核酸酶2(APEX2)ELISA試劑盒  APEX2 ELISA Kit  癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1抗體英文名稱:LDOC1 0.1ml

APEX核酸酶1(APEX1)ELISA試劑盒  APEX1 ELISA Kit  賴氨酰氧化酶相關(guān)蛋白2抗體英文名稱:LOXL2 0.2ml

Apelin受體(APLNR)ELISA試劑盒  APLNR ELISA Kit  基膜聚糖蛋白抗體英文名稱:Lumican 0.2ml

Apelin36蛋白(AP36)ELISA試劑盒  AP36 ELISA Kit  李斯特溶胞素抗體英文名稱:Listeriolysin 0.2ml

Apelin17蛋白(AP17)ELISA試劑盒  AP17 ELISA Kit  亮氨酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體英文名稱:LCMT1 0.2ml

Apelin13蛋白(AP13)ELISA試劑盒  AP13 ELISA Kit  宮頸癌原癌基因2抗體英文名稱:LETMD1 0.2ml

Apelin12蛋白(AP12)ELISA試劑盒  AP12 ELISA Kit  賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體英文名稱:LOXL4 0.2ml

Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒  APLN ELISA Kit  乳鐵蛋白抗體英文名稱:Lactoferrin 0.1ml

Anoctamin9蛋白(ANO9)ELISA試劑盒  ANO9 ELISA Kit  層粘連蛋白1+2抗體英文名稱:Laminin 1+2 0.1ml

Anoctamin8蛋白(ANO8)ELISA試劑盒  ANO8 ELISA Kit  富含亮氨酸重復(fù)蛋白15抗體英文名稱:LRRC15 0.2ml

Anoctamin7蛋白(ANO7)ELISA試劑盒  ANO7 ELISA Kit  受體蛋白酪氨酸磷酸酶F抗體英文名稱:LAR 0.2ml

Anoctamin6蛋白(ANO6)ELISA試劑盒  ANO6 ELISA Kit  磷酸化5-脂氧合酶抗體英文名稱:Phospho-5-Lipoxygenase(Ser524) 0.1ml

Anoctamin5蛋白(ANO5)ELISA試劑盒  ANO5 ELISA Kit  低分子質(zhì)量蛋白2抗體英文名稱:LMP2 0.1ml

Anoctamin3蛋白(ANO3)ELISA試劑盒  ANO3 ELISA Kit  低分子量蛋白酶體7抗體英文名稱:LMP7 0.2ml

Anoctamin4蛋白(ANO4)ELISA試劑盒  ANO4 ELISA Kit  單絲氨酸蛋白激酶1抗體英文名稱:LIMK1 0.1ml

50T小反芻獸疫病毒(PPRV)PCR檢測(cè)試劑盒25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,6X)   Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,6X)   常溫保存

25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X)   Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,4X)   常溫保存

25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,6X)   Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,6X)   常溫保存

25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (non reducing,4X)   Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (non reducing,4X)   常溫保存

25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)   Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)   常溫保存

25mL LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)  LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)  常溫保存

25mL LDS-Sample Buffer (reducing,4X)  LDS-Sample Buffer (reducing,4X)  常溫保存

5mg Leucine Solution(亮氨酸溶液),0.3% Leucine Solution,0.3% 常溫保存

50mL Lithium Chloride Solution(氯化鋰溶液),1M  Lithium Chloride Solution,1M  常溫保存

100mL Lithium Chloride Solution(氯化鋰溶液),200mM Lithium Chloride Solution,200mM 常溫保存

500mL Locke’s Solution Locke’s Solution 常溫保存

125mL Luminol and Oxidizing Solutions  Luminol and Oxidizing Solutions  常溫保存

500mL Lysis Buffer  Lysis Buffer  常溫保存

 


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