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技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T馬傳染性貧血(EIAV)PCR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):BH-P63941
規(guī)格:50T
分類:熒光-PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
62kDa核孔蛋白(NUP62)ELISA試劑盒 NUP62 ELISA Kit 間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體英文名稱:MEOX 2 0.2ml
60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒 HSPD1 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體英文名稱:MRGX1 0.1ml
5羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SERT)ELISA試劑盒 SERT ELISA Kit 黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體英文名稱:MAGEA11 0.2ml
5-羥色胺受體7(HTR7)ELISA試劑盒 HTR7 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體英文名稱:MAS1L 0.2ml
5-羥色胺受體4(HTR4)ELISA試劑盒 HTR4 ELISA Kit 麥芽糖結(jié)合蛋白抗體英文名稱:Maltose Binding Protein/MBP 0.2ml
5-羥色胺受體2A(HTR2A)ELISA試劑盒 HTR2A ELISA Kit 肌球蛋白XVIIIb抗體英文名稱:Myosin-XVIIIb 0.2ml
5-羥色胺受體1A(HTR1A)ELISA試劑盒 HTR1A ELISA Kit MAL蛋白抗體英文名稱:MAL 0.1ml
5-羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 5-HT ELISA Kit 麥芽糖孔蛋白抗體英文名稱:Maltoporin 0.2ml
5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 5-HIAA ELISA Kit 毒蕈堿樣蛋白3抗體英文名稱:MBNL3 0.2ml
5-甲基四氫葉酸高半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(MTR)ELISA試劑盒 MTR ELISA Kit 巨噬細(xì)胞清道夫受體1抗體英文名稱:MSR1 0.2ml
54kDa核孔蛋白(NUP54)ELISA試劑盒 NUP54 ELISA Kit 牛結(jié)核桿體蛋白抗體英文名稱:Mycobacterium bovis 0.1ml
5'-3'外切核糖核酸酶2(XRN2)ELISA試劑盒 XRN2 ELISA Kit T細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體英文名稱:MAL 0.1ml
5'-3'外切核糖核酸酶1(XRN1)ELISA試劑盒 XRN1 ELISA Kit 黑色素瘤相關(guān)抗原D1抗體英文名稱:MAGED1 0.2ml
4-羥基苯丙酮酸雙加氧酶(HPD)ELISA試劑盒 HPD ELISA Kit MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體英文名稱:MDMX 0.1ml
50kDa核孔蛋白(NUP50)ELISA試劑盒 NUP50 ELISA Kit 中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體英文名稱:MIER2 0.2ml
50T馬傳染性貧血(EIAV)PCR檢測(cè)試劑盒500mL MOPS Buffered Saline,5X,pH7.0 MOPS Buffered Saline,5X,pH7.0 常溫保存
500mL MOPS Buffered Saline,5X,pH7.2 MOPS Buffered Saline,5X,pH7.2 常溫保存
500mL MOPS Buffered Saline,5X,pH7.4 MOPS Buffered Saline,5X,pH7.4 常溫保存
500mL MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X 常溫保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH6.0 MOPSO Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5 MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5 常溫保存
500mL MOPS-SDS Running Buffer,20X MOPS-SDS Running Buffer,20X 常溫保存
250mL Neutralization Solution Neutralization Solution 常溫保存
50mL Nickel Chloride Solution(氯化鎳溶液),0.5M Nickel Chloride Solution,0.5M 常溫保存
50mL Nickel Sulfate Solution(硫酸鎳溶液),0.5M Nickel Sulfate Solution,0.5M 常溫保存
250mL Nitrocellulose Stripping Buffer,10X(硝酸纖維素膜剝離緩沖液,10X) Nitrocellulose Stripping Buffer,10X 常溫保存