咨詢電話:18117197628
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T牛流行熱病毒(BEFV)PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63942 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶(ABAT)ELISA試劑盒 ABAT ELISA Kit RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體英文名稱:MCG10 0.2ml
43kDa核孔蛋白(NUP43)ELISA試劑盒 NUP43 ELISA Kit 線粒體核糖體蛋白S4抗體英文名稱:MRPS4 0.1ml
3-羥基異丁酸脫氫酶(HIBADH)ELISA試劑盒 HIBADH ELISA Kit 緊密連接蛋白MUPP1抗體英文名稱:MUPP1 0.2ml
3-羥基丁酸脫氫酶2(BDH2)ELISA試劑盒 BDH2 ELISA Kit 肌管素相關(guān)蛋白14抗體英文名稱:MTMR14 0.2ml
3-羥基丁酸脫氫酶1(BDH1)ELISA試劑盒 BDH1 ELISA Kit 小腦癥基因1/認知相關(guān)蛋白抗體英文名稱:Microcephalin 1/BRIT1 0.2ml
37kDa核孔蛋白(NUP37)ELISA試劑盒 NUP37 ELISA Kit 鋅指蛋白60抗體英文名稱:Miz1/ZNF60 0.2ml
35kDa核孔蛋白(NUP35)ELISA試劑盒 NUP35 ELISA Kit 肌球蛋白6抗體英文名稱:MYO6 0.2ml
3',5'-二磷酸核苷酸酶1(BPNT1)ELISA試劑盒 BPNT1 ELISA Kit 肌肉素抗體英文名稱:Musclin 0.2ml
2-氨基乙硫醇雙加氧酶(ADO)ELISA試劑盒 ADO ELISA Kit 代謝型谷氨酸受體-3抗體英文名稱:MGLUR3 0.2ml
27kDa熱休克蛋白(HSPB1)ELISA試劑盒 HSPB1 ELISA Kit 促代謝型谷氨酸受體2+3抗體英文名稱:MGLUR2 + MGLUR3 0.2ml
26S-蛋白酶體(26S-PSM)ELISA試劑盒 26S-PSM ELISA Kit 促代謝型谷氨酸受體1+5抗體英文名稱:MGLUR1 + MGLUR5 0.2ml
25-羥基維生素D3(HVD3)ELISA試劑盒 HVD3 ELISA Kit MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復合物MHCIa抗體英文名稱:MICA 0.1ml
24-脫氫膽固醇還原酶(DHCR24)ELISA試劑盒 DHCR24 ELISA Kit 肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體英文名稱:MURF2 0.2ml
210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA試劑盒 NUP210 ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體英文名稱:phospho-MST1R(Tyr1353) 0.1ml
214kDa核孔蛋白(NUP214)ELISA試劑盒 NUP214 ELISA Kit 肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體英文名稱:MURF3 0.2ml
50T牛流行熱病毒(BEFV)PCR檢測試劑盒500mL Normal Tyrode’s Bicarbonate Buffered Solution Normal Tyrode’s Bicarbonate Buffered Solution 常溫保存
125mL NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X(含甘油型NP40裂解液,2X) NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X 常溫保存
250mL NP40 Lysis Buffer(NP40裂解液) NP40 Lysis Buffer 常溫保存
125mL NP40 Lysis Buffer,2X(NP40裂解液,2X) NP40 Lysis Buffer,2X 常溫保存
250mL NP40 Lysis Buffer,High Salt(高鹽型NP40裂解液) NP40 Lysis Buffer,High Salt 常溫保存
250mL NP40 Lysis Buffer,Low Salt(低鹽型NP40裂解液) NP40 Lysis Buffer,Low Salt 常溫保存
250mL NP40 Permeating Solution in PBS,10X(NP40滲透液,10X) NP40 Permeating Solution in PBS,10X 常溫保存
250mL NP40 Permeating Solution in TBS,10X(NP40滲透液,10X) NP40 Permeating Solution in TBS,10X 常溫保存
250mL Nylon Membrane Stripping Buffer,10X(尼龍膜剝離緩沖液,10X) Nylon Membrane Stripping Buffer,10X 常溫保存
25mL Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based) Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based) 常溫保存
10mL Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Ficoll based) Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Ficoll based) 常溫保存
25mL Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based) Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based) 常溫保存
250mL Para-formaldehyde fixative Solution Para-formaldehyde fixative Solution 常溫保存