注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（*好用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體英文名稱：MARK4 0.1ml

  苯甲酸肽水解酶抗體英文名稱：MEP1A 0.1ml

  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體英文名稱：phospho-MEK2(Thr394) 0.1ml

  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體英文名稱：phospho-MEK3(Thr222) 0.1ml

  絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱：MEK5 0.1ml

  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱：phospho-MEK5(Ser142) 0.1ml

  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱：phospho-MEK5(Ser311+Thr315) 0.1ml

  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱：phospho-MEK5(Ser129) 0.1ml

  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱：phospho-MEK5(Ser137) 0.1ml

  細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體英文名稱：MIG5 0.1ml

  致癌基因抗體英文名稱：MTLC 0.2ml

  絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體英文名稱：MAP4K5 0.1ml

  MKLN1抗體英文名稱：MKLN1 0.1ml

  MPP2蛋白抗體英文名稱：MPP2 0.1ml

  絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗體英文名稱：MAP2K1IP1 0.1ml

50T貓杯狀病毒（FCV）PCR檢測試劑盒125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液），pH7.6  RNase-Free TE Buffer，pH7.6  常溫保存

125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液），pH8.0    RNase-Free TE Buffer，pH8.0    常溫保存

250mL RNase-Free Tris-HCl Solution（無RNase的Tris-HCl溶液）,1M,pH7.4   RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH7.4   常溫保存

250mL RNase-Free Tris-HCl Solution（無RNase的Tris-HCl溶液）,1M,pH8.0   RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH8.0   常溫保存

125mL Saponine Permeating Solution in PBS（皂素PBS滲透液）,5X  Saponine Permeating Solution in PBS,5X  常溫保存

125mL Saponine Permeating Solution in TBS,5X   Saponine Permeating Solution in TBS,5X   常溫保存

250mL SDS Solution（SDS溶液）,10%  SDS Solution,10%  常溫保存

250mL SDS Solution（SDS溶液），20%，pH7.2 SDS Solution，20%，pH7.2 常溫保存

1000mL Semi Dry Blot Transfer Buffer  Semi Dry Blot Transfer Buffer  常溫保存

500mL Separating or Resolving Buffer（分離膠緩沖液） Separating or Resolving Buffer 常溫保存

125mL Sodium Acetate Solution（乙酸鈉溶液）,3M,pH4.5    Sodium Acetate Solution,3M,pH4.5    常溫保存

125mL Sodium Acetate Solution（乙酸鈉溶液）,3M,pH5.2   Sodium Acetate Solution,3M,pH5.2   常溫保存

125mL Sodium Acetate Solution（乙酸鈉溶液）,3M,pH7.0   Sodium Acetate Solution,3M,pH7.0   常溫保存