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原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T糞腸球菌(EF)PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P64031
規(guī)格:50T
分類:熒光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
p400蛋白抗體英文名稱:p400 0.1ml
血小板源性生長因子C抗體英文名稱:PDGFC 0.2ml
血小板源性生長因子D(脊髓源性生長因子B)英文名稱:PDGF-D 0.1ml
非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗體英文名稱:PAR3 0.1ml
原鈣粘蛋白13抗體英文名稱:PCDHB13 0.2ml
26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體英文名稱:PSMC1 0.1ml
原鈣粘蛋白β11抗體英文名稱:PCDHB11 0.2ml
軸周蛋白PRX抗體英文名稱:PRX 0.1ml
豬藍耳病病毒GP5蛋白抗體英文名稱:PRRSV-GP5 0.1ml
p21激活激酶1抗體英文名稱:PAK1 0.1ml
蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體英文名稱:PDIA2 0.2ml
脯氨酰羥化酶抗體英文名稱:PHD1 0.1ml
抗豬瘟病毒抗體英文名稱:Classical swine fever virus 0.2ml
蛋白質(zhì)磷酸酶2A亞基3抗體英文名稱:PPP2R3 0.2ml
胰脂肪酶相關蛋白1抗體英文名稱:PLRP1 0.1ml
50T糞腸球菌(EF)PCR檢測試劑盒大豆蛋白胨(晶體) 用于培養(yǎng)基、生物發(fā)酵的原材料 25kg
大豆蛋白胨(精華) 用于培養(yǎng)基、生物發(fā)酵的原材料 25kg
大豆蛋白胨F 用于培養(yǎng)基、生物發(fā)酵的原材料 25kg
大豆粉木瓜酶消化物 USP 用于培養(yǎng)基、生物發(fā)酵的原材料 25kg
大豆酪蛋白瓊脂TSA瓶裝顆粒培養(yǎng)基 用于普通的或營養(yǎng)要求較高的以及用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無程度的劑效果的測試 10袋(300mL/袋)
大豆卵磷脂 乳化劑,且具有表面活性作用 25g
單核增生性李斯特氏生化鑒定盒 單核增生性李斯特氏常見的9項生化反應。(參考“食品安國內(nèi)家標準”GB4789.30-2010) 10種×10支/盒
單核增生性李斯特氏生化鑒定盒(SN標準) 單核增生性李斯特氏常見的13項生化反應。(參考“中華人民共和國進出口商品檢驗行業(yè)標準SN/ 13種×10次/盒
單增李斯特氏顯色培養(yǎng)基 用于分離和初步鑒別單增李斯特。 1000ml
膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL) 用于腸道致病特別是沙門氏和志賀氏的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華人民共和國藥典》2010年版) 250g
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL) 用于腸道致病特別是沙門氏和志賀氏的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華人民共和國藥典》2010年版) 250g
膽鹽乳糖顆粒培養(yǎng)基 用于藥品中大腸桿和綠膿桿的增培養(yǎng) 10袋(300mL配量/袋)
技術(shù)原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。