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產品詳情
  • 產品名稱:50T河弧菌(VF)核酸定性檢測試劑盒

  • 產品型號:BH-P64258
  • 產品**:博湖
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
50T河弧菌(VF)核酸定性檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
詳情介紹:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

規(guī)格

貨號

50T河弧菌(VF)核酸定性檢測試劑盒

50T

BH-P64258

它具有下列特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產品只能用于科研。


實驗方法步驟:

方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 647 0.1ml

  PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 0.1ml

  FITC標記的兔抗小鼠IgG-FcRabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC 0.1ml

  辣根過氧化物酶標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP 0.1ml

  PE-Cy3標記的兔抗猴IgMRabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3 0.1ml

  PE-CY5標記的兔抗猴IgMRabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5 0.1ml

  PE-Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5 0.1ml

  PE-Cy3標記的兔抗長爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-Cy3 0.1ml

  PE-CY5標記的兔抗長爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-CY5 0.1ml

  PE-Cy7標記的兔抗長爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-Cy7 0.1ml

  Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 488 0.1ml

  Alexa Fluor 555標記的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 0.1ml

  PE-Cy5.5標記的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/PE-Cy5.5 0.1ml

  PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy5.5 0.1ml

  PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/PE-Cy7 0.1ml

50T河弧菌(VF)核酸定性檢測試劑盒木犀草素;Luteolin CAS 491-70-3 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

蘿卜素;Sulforaphane CAS 4478-93-7 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

克班寧;Crebanine CAS 25127-29-1 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

4-甲氧基水楊酸;4-Methoxysa CAS 2237-36-7 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

菊苣酸;Cichoric acid CAS 70831-56-0 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

環(huán)氧澤瀉烯;Alismoxide CAS 87701-68-6 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

告庭;Caudatin CAS 38395-02-7 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

紅柿堿;Tomatine CAS 17406-45-0 訂購|咨詢  規(guī)格: 10mg

二苯乙烯苷;tetrahydroxyl CAS 82373-94-2 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

大果桉醛B;Macrocarpal B CAS 142698-60-0 訂購|咨詢  規(guī)格: 10mg

丹酚酸A;Salvialic aci CAS 96574-01-5 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

草質素苷;Rhodionin;Herba CAS 85571-15-9 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

穿琥寧;Kalii Dehydrogra CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

白樺脂醛;Betulinicaldehy CAS 13159-28-9 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

表沒食子兒茶素;(-)-Epigallo CAS 970-74-1 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

磺胺二甲;純品型;標準品;有證書 CAS 57-68-1 訂購|咨詢  規(guī)格: 0.1g

注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

 


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