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原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:48T 0.1PCR管轉(zhuǎn)基因玉米Bt10PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P64350
規(guī)格:48T 0.1PCR管
分類:PCR-熒光探針法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 0.5mg
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原)AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 0.5mg
14-3-3 蛋白(多肽抗原)14-3-3 protein 0.5mg
植物14-3-3蛋白抗原14-3-3 family protein(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris)) 0.5mg
FRA-1多肽蛋白FRA1/FOSL1 peptide 1mg
調(diào)亡誘導因子(多肽片斷抗原)AIF (Apoptosis-Inducing Factor) 0.5mg
腺苷酸激酶-1Adenylate Kinase 1 (AK-1) 0.5mg
蛋白激酶B(抗原)Akt/PKB 0.5mg
癌相關(guān)抗原CA153/MUC1/KL-6 peptide 0.5mg
間變型瘤激酶(抗原)ALK (Anaplastic Lymphoma Kinase)(CD246Ag) 0.5mg
5-羥色胺5-HT(5-Hydroxy-L-tryptophan/L-5-HTP) 20mg
5-羥色胺受體1A(多肽)5-HTR1A (5-HT1A (5-hydroxytryptamine/serotonin receptor 1A; 5HT1a; ADRBRL1; ADRB2RL1; HTR1A) 0.5mg
膜粘連蛋白A3抗體Annexin Ⅲ peptide 0.5mg
金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 0.5mg
金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 0.5mg
48T 0.1PCR管轉(zhuǎn)基因玉米Bt10PCR檢測試劑盒3,4,5-三啡酰奎寧酸 CAS 86632-03-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
豆蔻酸甘油三酯 CAS 555-45-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
去氫駱駝蓬堿 CAS 442-51-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
牡荊油 CAS 11027-63-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
堅牢藍BB鹽 CAS 5486-84-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
紅花八角醇 CAS 139726-29-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
1,7-二羥基-3,4-二甲氧基山-7 CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
粗壯女貞苷N CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
扁柏雙黃 CAS 19202-36-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
雞屎藤苷酸 CAS 18842-98-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
纈草三酯 CAS 18296-44-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
山姜素 CAS 1090-65-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
單啡酰酒石酸 CAS 67879-58-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
馬兜鈴酸B CAS 475-80-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
加蘭他敏 CAS 357-70-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
L-天冬氨酸 CAS 56-84-8 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%;200mg
技術(shù)原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。