試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
當(dāng)藥黃素 Swertisin 1859726 10mg

當(dāng)藥醇苷 Swertianolin 23445-00-3 10mg

佛手柑素 Bergamottin 7380-40-7 10mg

諾卡酮 Nootkatone(+)- 4674-50-4 20mg

去氫毛鉤藤堿 Hirsuteine 35467-43-7 5mg

常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷 Hederagenin 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 53931-25-2 10mg

旱蓮苷D Ecliptasaponin D 206756-04-9 10mg

毛鉤藤堿  Hirsutine 7729-23-9 5mg

齊墩果酮酸 3-Oxooleanolic acid 17990-42-0 10mg

筋骨草甾酮C Ajugasterone C 23044-80-6 10mg Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-LDH-A / LDHA Immunomagnetic Beads IP    5 mL

Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-LDH-A / LDHA Immunomagnetic Beads IP    5 mL

大鼠 IL4 基因全長ORF克隆

人 IL1RAP / IL1R3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

小鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 IL1F2 / IL1B 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CTSQL2 基因全長ORF克隆

人 CHST15 / BRAG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 TPBPA 基因全長ORF克隆

Simple Magnetic Separator  1 each

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA KitPAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7抗體 0.2ml

TNF受體關(guān)聯(lián)因子3(TRAF3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 3 (TRAF3)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Phospho-PFK2 (Ser467)  磷酸化6磷酸果糖激酶2抗體 0.1ml

酪蛋白激酶1δ(CSNK1δ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Casein Kinase 1 Delta (CSNK1d)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

PNMT  苯甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml

17-β-羥基類固醇脫氫酶10(HSD17β10)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 10 (HSD17b10)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

CD66a/CEACAM1  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.2ml

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1(TITF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Thyroid Transcription Factor 1 (TITF1)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

phospho-ROCK1(Thr455/Ser456)  磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 0.1ml

組氨酸豐富糖蛋白(HRG)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Histidine Rich Glycoprotein (HRG)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)

Phospho-INPPL1(Tyr986/987)  肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 0.1ml

肌球蛋白重鏈8(MYH8)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 8, Skeletal Muscle, Perinatal (MYH8)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)