操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標(biāo)準進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測，我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準品(凍干品)：每瓶標(biāo)準品加入標(biāo)準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標(biāo)準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確，每次檢測均需做標(biāo)準曲線。
3--2-氯-5-甲吡分子式：142.59分子量： C6H7ClN2英文名稱：3- amino -2- -5-CAS號：34552-13-1

2,8-二三氟甲-4-羥分子式：281.15分子量： C11H5F6NO英文名稱：2,8- two or three hydroxy -4-CAS號：35853-41-9

硫酸甲酯鉀分子式：150.2分子量： CH3KO4S英文名稱：Potassium methyl sulfateCAS號：562-54-9

3,6-二咔分子式：319.41分子量： C24H17N英文名稱：3,6- two phenyl carbazoleCAS號：56525-79-2

吡分子式：79.1分子量： C5H5N英文名稱：PyridineCAS號：110-86-1

3-氯-4-硝甲分子式：171.58分子量： C7H6ClNO2英文名稱：3- -4- nitro tolueneCAS號：38939-88-7

1-乙烷-4-[4-正己]分子式：290.44分子量： C22H26英文名稱：1- -4-[4- ethyl hexyl phenyl ethynyl] benzeneCAS號：117923-34-9

硫酸亞鈦溶液分子式：383.92分子量： O12S3Ti2英文名稱：Titanium sulfate solutionCAS號：10343-61-0

5-溴分子式：208.06分子量： C9H6BrN英文名稱：5- bromideCAS號：4964-71-0

4-甲-5-乙酰噻分子式：141.19088分子量： C6H7NOS英文名稱：4甲- 5 -乙酰噻CAS號：38205-55-9食蟹猴 IFNA8 基因全長ORF克隆

食蟹猴 IFNA8 基因全長ORF克隆

人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 CD55 / DAF ELISA配對抗體

人 BNIPL 基因全長ORF克隆

人 CIB2 ELISA配對抗體

人 CABC1 / ADCK3 基因全長ORF克隆

人 BRK 基因全長ORF克隆

人 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 OASL 基因全長ORF克隆

人 PDCD4 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠抗Smith抗體(Sm)免費代測ELISA KitPhospho-HER2 (Tyr877)  磷酸化HER2受體抗體 0.1ml

Sestrin 3蛋白(SESN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Sestrin 3 (SESN3)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

HO-1  血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體 0.1ml

生長抑素受體5(SSTR5)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Somatostatin Receptor 5 (SSTR5)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

phospho-IGF1R(Tyr1280)  磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體 0.1ml

鞘磷脂合酶2(SGMS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Sphingomyelin Synthase 2 (SGMS2)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

IL-4  白介素4抗體 0.1ml

磷脂酰乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(PEMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Phosphatidylethalamine-N-Methyltransferase (PEMT)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

JNK2  氨基末端激酶2抗體 0.2ml

血管抑制蛋白1(VASH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Vasohibin 1 (VASH1)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

LDHC/Cancer,testis antigen 32  乳酸脫氫酶LDH-C（腫瘤/抗原32）抗體 0.1ml

紋蛋白(STRN)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Striatin (STRN)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)