操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測，我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確，每次檢測均需做標準曲線。
3--4-吡分子式：108.1分子量： C4H4N4英文名稱：3- -4- cyano amino pyrazoleCAS號：16617-46-2

氯錳分子式：197.91分子量： MnCI2?4H2O英文名稱：Manganese chlorideCAS號：13446-34-9

喜樹堿英文名稱：Base of theCAS號：2114454分子式：348.35204分子量：C20H16N2O4

磺鋇英文名稱：Two aniline sulfonic acidCAS號：6211-24-1分子式：633.88分子量： C24H20BaN2O6S2

戊聯(lián)分子式：224.34分子量： C17H20英文名稱：Amyl biphenylCAS號：7116-96-3

2,4-二-6-羥嘧分子式：126.12分子量： C4H6N4O英文名稱：2,4- two hydroxy -6-CAS號：20610

3-溴分子式：208.05分子量： C9H6BrN英文名稱：3- bromideCAS號：5332-24-1

人參皂苷RH3英文名稱：Ginsenoside RH3CAS號：105558-26-7分子式：604.863分子量：C36H60O7

人參皂苷Rh1英文名稱：Ginsenoside Rh1CAS號：63223-86-9分子式：638.87208分子量：C36H62O9

4-吡嘧分子式：135.13分子量： C5H5N5英文名稱：4- amino groupCAS號：20289-44-5重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽)

人 SOCS3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

大鼠 DNPEP 基因全長ORF克隆

人 RSPO3 基因全長ORF克隆

人 MLANA 基因全長ORF克隆

人 ATP6AP2 基因全長ORF克隆

人 CDKAL1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 ELISA配對抗體

大鼠 PPME1 基因全長ORF克隆

狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免費代測ELISA KitLIFR/CD118  白血病抑制因子受體抗體 0.1ml

防御素β2(DEFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Defensin Beta 2 (DEFb2)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 0.1ml

白介素9(IL9)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Interleukin 9 (IL9)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

Melama HMB45/Melama/Melan-A/MART-1  黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 0.1ml

巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP3β)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta (MIP3b)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

MLN/Motilin  胃動素抗體 0.1ml

白介素8受體α(IL8Rα)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

phospho-NF1(Ser2515)  磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml

腎足蛋白(NPHN)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Nephrin (NPHN)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)

NRAS  原癌基因N-Ras抗體 0.1ml

嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)    ELISA Kit for Eosiphil Chemotactic Factor (ECF)    規(guī)格：48T/96T 進口、國產(chǎn)