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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免ELISA Kit

  • 產(chǎn)品型號(hào):PM104292
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA Kit檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
詳情介紹:

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA Kit

英文名稱

Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit

貨號(hào)

PM104292

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2-氯-5-羥三氟甲分子式:196.55分子量: C7H4ClF3O英文名稱:2- Cl -5- hydroxy three fCAS號(hào):6294-93-5

2,5-雙(4-二乙)-1,3,4-惡二分子式:364.49分子量: C22H28N4O英文名稱:2,5- bis (4- two) -1,3,4- twoCAS號(hào):1679-98-7

4-己-4`-[2-(4-異硫)乙]-1,1`-聯(lián)分子式:399.59分子量: C27H29NS英文名稱:4- -4`-[2- (4- hexyl isothiocyanate phenyl) ethyl biphenyl]-1,1`-CAS號(hào):110499-97-3

乙酰紫草素英文名稱:AcetylshikoninCAS號(hào):24502-78-1分子式:330.33分子量:C18H18O6

異補(bǔ)骨脂素英文名稱:IsopsoralenCAS號(hào):523-50-2分子式:186.16分子量:C11H6O3

1-溴-3-氯-5-碘分子式:317.35分子量: C6H3BrClI英文名稱:1- -3- -5- bromine chloride iodobenzeneCAS號(hào):13101-40-1

桿肽分子式:1422.69分子量: C66H103N17O1英文名稱:Bacillus sp.CAS號(hào):1405-87-4

1-乙氧-4-(反-4-n-丙環(huán)己)分子式:246.39分子量: C17H26O英文名稱:1- ethyoxyl -4- (anti -4-n- propyl cyclohexyl benzene)CAS號(hào):80944-44-1

1-(4-硝芐)吡分子式:203.2分子量: C10H9N3O2英文名稱:1- (4- nitro group)CAS號(hào):110525-57-0

4-分子式:161.25分子量: C11H15N英文名稱:4- phenylpiperidineCAS號(hào):771-99-3人 KRT16 基因全長(zhǎng)ORF克隆

KRT16 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 MYL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

DCTN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 BMPER 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 IGSF8 基因全長(zhǎng)ORF克隆

Alkaline Phosphatase / ALPI 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

SEMA5A 基因全長(zhǎng)ORF克隆

Frizzled-5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)

食蟹猴 CD3D 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA KitMKK7/ERK7  絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 0.1ml

形成素結(jié)合蛋白1(FNBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Formin Binding Protein 1 (FNBP1)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

Phospho-Paxillin(Tyr88)  磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 0.1ml

Bcl2拮抗/殺傷因子1(BAK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Bcl2 Antagonist/Killer 1 (BAK1)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

phospho-PI3KCA(Tyr317)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 0.1ml

蛋白酶3(PR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)  磷酸化組蛋白去乙?;?/5/7抗體 0.1ml

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

RAE1  mRNA結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

乙基丙二酸腦病變基因1(ETHE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Ethylmalonic Encephalopathy 1 (ETHE1)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

SDHA  琥珀酸脫氫酶復(fù)合體亞基A抗體 0.2ml

特異性蛋白1(Sp1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Specificity Protein 1 (Sp1)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

操作流程:
1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

 

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