咨詢電話:18117197628
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)免費代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Protein Wnt-10b,WNT10B ELISA kit |
貨號 |
PM104480 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4-羥甲-4'-甲-2,2'-聯(lián)吡分子式:200.24分子量: C12H12N2O英文名稱:4-, -4'-, -2,2'-CAS號:81998-04-1
鄰硝三氟甲分子式:191.11分子量: C7H4F3NO2英文名稱:Ortho nitro three fCAS號:384-22-5
4-甲-5-甲酰噻分子式:127.16分子量: C5H5NOS英文名稱:4- -5- benzoyl methyl thiazoleCAS號:82294-70-0
過氧羥異丙分子式:152.19分子量: C9H12O2英文名稱:Cumene hydroperoxideCAS號:80-15-9
3-乙酰-2-溴吡分子式:200.03分子量: C7H6BrNO英文名稱:3- acetyl -2-CAS號:84199-61-1
佛手苷內(nèi)酯英文名稱:Bergamot lactone glycosideCAS號:484-20-8分子式:216.18952分子量:C12H8O4
葫蘆素I英文名稱:Gourd ICAS號:117793分子式:514.65分子量:C30H42O7
性紅18英文名稱:Acid red 18CAS號:2611-82-7分子式:604.47分子量: C20H11N2Na3O10
鉤藤皂苷I英文名稱:Effect of ginsenoside ICAS號:21-2001分子式:分子量:
5-甲-3-吡分子式:108.14分子量: C6H8N2英文名稱:5- methyl -3-CAS號:3430-19-1人 HOXC10 基因全長ORF克隆
人 HOXC10 基因全長ORF克隆
狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-Synapsin I / Synapsin-1 Immunomagnetic Beads IP 5 mL
小鼠 SERPINB6A 基因全長ORF克隆
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-Carbonic Anhydrase XIV Immunomagnetic Beads IP 5 mL
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-MDHA / MDH1 Immunomagnetic Beads IP 5 mL
重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)
人 BCDIN3D 基因全長ORF克隆
小鼠 CXCL12 / SDF1b 基因全長ORF克隆
人 ADCK4 基因全長ORF克隆
人 DHRS9 基因全長ORF克隆
小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)免費代測ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光分析法) 特價促銷 英文名稱: Rattus rvegicus (Rat)
心肌素(MYOCD)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Myocardin (MYOCD) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
催乳素(PRL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光分析法) 進口、分裝 英文名稱: Homo sapiens (Human)
Neurotrimin蛋白(NTM)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Neurotrimin (NTM) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
抵抗素(RETN)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光分析法) 進口、原裝 英文名稱: Mus musculus (Mouse)
延胡索二酰乙酰乙酸水解酶(FAH)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Fumarylacetoacetate Hydrolase (FAH) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
多巴胺(DA)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光分析法) 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱: General
酸性幾丁質(zhì)酶(CHIA)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Chitinase, Acidic (CHIA) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光分析法) 特價促銷 英文名稱: Homo sapiens (Human)
釉原蛋白Y-連鎖(AMELY)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Amelogenin, Y-Linked (AMELY) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
Apelin 12蛋白(AP12)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光分析法) 進口、分裝 英文名稱: Homo sapiens (Human)
絡(luò)絲蛋白(RL)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISA Kit for Reelin (RL) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。