咨詢(xún)電話:18117197628
我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅲ(COX3)ELISA Kit |
英文名稱(chēng) |
Mouse Cytochrome C Oxidase Subunit III(COX3)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM104908 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br>
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
知母皂苷A3 英文名稱(chēng) Timosaponin a-Ⅲ 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
霉酚酸酯 英文名稱(chēng) Mycophenolate mofetil 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥98%
胡黃連苷-Ⅲ 英文名稱(chēng) Picroside-Ⅲ 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥97%
高車(chē)前苷 英文名稱(chēng) Homoplantaginin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥95%
湖北貝母 英文名稱(chēng) TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
棕櫚酸甲酯 英文名稱(chēng) 供檢查用 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
川芎 英文名稱(chēng) TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
甲磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):74223-64-6 100MG 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
常春藤皂苷元 英文名稱(chēng) 常春藤皂甙元 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Hederagenin
乳酶生種 英文名稱(chēng) 標(biāo)準(zhǔn)試劑 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 生產(chǎn)用種
蜂膠 英文名稱(chēng) 中藥對(duì)照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: TLC法鑒別小鼠 BACE2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 BACE2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
c-MET / HGFR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
ErbB2 / HER2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-CD164 / Endolyn Immunomagnetic Beads IP 5 mL
Bcl-2 / BCL2 轉(zhuǎn)錄變體alpha 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
IL24 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ALG2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 CD200R / OX2-R 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
GLMN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TFF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CRIP2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅲ(COX3)ELISA KitCIN-1I培養(yǎng)基基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏 (GB標(biāo)準(zhǔn)) Cepulodin Irgasan vobiocin Agar 250
細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml
營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 一般細(xì)培養(yǎng),轉(zhuǎn)種,復(fù)壯,增等.也可用于**效果測(cè)定 Nutrient Broth 250
骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 Anti-BMP4 0.1ml
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 細(xì)計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn)),不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ),傳代用.也可用于**效果測(cè)定 Nutrient Agar 250
骨成型蛋白受體1A抗體 Anti-BMPR-1A 0.1ml
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于環(huán)氧乙烷**和電離輻射**過(guò)程監(jiān)測(cè)指示(枯草桿黑色變種芽孢及短小桿芽孢)的培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 0.5% Dextrose Broth 250
腦鈉素/利鈉肽抗體 Anti-BNP 0.1ml
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于壓力蒸氣**過(guò)程監(jiān)測(cè)指示(嗜熱脂肪桿芽孢)的培養(yǎng)及**效果測(cè)定 Glucase Peptone Water Medium 250
B Raf抗體 Anti-B Raf 0.1ml
液體沙氏培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于真、酵母增 Liquid Sabourand Medium 250
乳癌易感基因1抗體 ()Anti-BRCA1 0.1ml
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。