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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br>
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Microsomal Glutathione S Transferase 1(MGST1)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM104934 |
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
環(huán)維黃楊星D 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: uv含量測(cè)定
香葉醇 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: GC法含量測(cè)定
紫丁香苷 英文名稱 Syringin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 95%
7-乙基-10-羥基喜樹堿 英文名稱 7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥98%
防己諾林堿(漢防已乙素) 英文名稱 Fangchinoline 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
紫金蓮 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
牛磺酸 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
芐氨酸雜質(zhì)A(3-羥基-1-芐基吲) 英文名稱 檢查 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
苯噻啶 英文名稱 檢查用 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):56238-63-2 200mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
薯蕷皂苷 英文名稱 薯蕷皂甙; 重樓皂苷III; 重樓皂甙III 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Dioscin狗 GFRA1 / GFR alpha-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 GFRA1 / GFR alpha-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Contactin 4 / CNTN4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Immunoprecipitation/IP Kit- Myc Tag Immunomagnetic Beads 5 mL
大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
ST8SIA4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 Immunomagnetic Beads IP 5 mL
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-SerpinB1 / ELANH2 Immunomagnetic Beads IP 5 mL
重組 VSTM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CAMK1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
重組 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-CD69 / CLEC2C / AIM Immunomagnetic Beads IP 5 mL
小鼠微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)ELISA Kit氣單胞培養(yǎng)基添加劑 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 每支添加劑加入100ml氣單胞培養(yǎng)基基礎(chǔ) Ampicillin Selective Supplement 10支
β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒英文名稱:human β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基 Mycoplasma Broth Base 250
假定蛋白LOC677168 ELISA試劑盒英文名稱:human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠抗凝血酶受體(ATR)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
胰蛋白胨大豆瓊脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 一種通用培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)(AOAC EP IDF NMKL USDA USP) Tryptose Soya Agar 250
α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒 英文名稱:Human α-galactoyl,Gal ELISA Kit規(guī)格:96T/48T凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
布氏選擇性培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于布氏的選擇性分離培養(yǎng) Brucella Selective Medium 250
可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒英文名稱:Human soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
改良rv培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Rv 250
分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human secretory immuglobulin A,SIgA ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eS)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
類桿-膽汁-七葉甙(BBE)瓊脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于脆弱擬桿群的分離培養(yǎng) BBE Agar 250
胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒英文名稱:Human insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝