咨詢電話:18117197628
我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠凝血因子Ⅴ(F5)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Coagulation Factor V(F5)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM105150 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br>
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
鹽酸地巴 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC法含量測(cè)定用
土木香內(nèi)酯 英文名稱 Alantolactone 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥98%
雙去氧基姜黃素 英文名稱 Bisdemethoxycurcumin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥97%
杜鵑素 英文名稱 Farrerol 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥95.0%
伸筋草 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
茴香醛 英文名稱 鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
落花生枝葉 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
新諾明 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):723-46-6 250MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
丁烯基苯酞 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 3-Butylidenephthalide
硝西泮 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 含量測(cè)定
甲硫氨酸 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 含量測(cè)定(S,E)-3-(6-Bromopyridin-2-yl)-2-cyano-N-(1-phenylbutyl)acrylamide; DegrasynWP-1130
Desmosterol (1 mg)24-dehydro Cholesterol|NSC 226126; (3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol
Calcium Detector R1 (15 ml)Calcium Detector R1
羥芐素二鈉(10GM)Carbenicillin, Disodium Salt, ≥90%
Cysmethynil (25 mg)5-(3-methylphenyl)-1-octyl-1H-indole-3-acetamide; Icmt Inhibitor; Cysmethynil
Rosiglitazone Maleate (100 mg)Avandia|BRL 49653C; 5-[[4-[2-(methyl-2-pyridinylamino)ethoxy]phenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione, (2Z)-2-butenedioate (1:1)
氯霉素-卵白蛋白偶聯(lián)物[用于ELISA]Chloramphenicol-Ovalbumin Conjugate
ABT-737 (25 mg)4-[4-[(4’-chloro[1,1’-biphenyl]-2-yl)methyl]-1-pipeazinyl]-N-[[4-[[(1R)-3-(dimethylamino)-1-[(phenylthio)methyl]propyl]amino]-3-nitrophenyl]sulfonyl]-benzamide
MAZ51 (25 mg)3-[[4-(dimethylamino)-1-naphthalenyl]methylene]-1,3-dihydro-2H-indol-2-one
Naloxone (hydrochloride) (250 mg)N-Allyldihydro-14-hydroxynormorphinone|NIH 7890; 4,5α-epoxy-3,14-dihydroxy-17-(2-propen-1-yl)-morphinan-6-one, monohydrochloride
(±)9-HEPE (100 ug)(±)-9-hydroxy-5Z,7E,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)9-HEPE
PF-8380 (5 mg)4-[3-(2,3-dihydro-2-oxo-6-benzoxazolyl)-3-oxopropyl]-(3,5-dichlorophenyl)methyl ester-1-pipeazinecarboxylic acid; PF-8380
小鼠凝血因子Ⅴ(F5)ELISA試劑盒 緩沖 MUG 瓊脂 2000ml/瓶 用于濾膜法測(cè)定大腸桿特價(jià)供應(yīng)
α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human α-Smooth muscle actin,α-SMA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
乳糖肉湯 250g/瓶 用于大腸群測(cè)定(USP),也用 于沙門氏前增(ISO)現(xiàn)貨促銷
協(xié)同激分子受體(CMR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂LMG 250g/瓶 用于大腸群濾膜法檢測(cè)特價(jià)供應(yīng)
糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Carbohydrate antigen19-9,CA19-9 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠催乳素(PRL)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
胰蛋白胨膽汁瓊脂(TBA) 250g/瓶 用于大腸桿濾膜法檢測(cè)現(xiàn)貨促銷
甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 250g/瓶 用于大腸群的測(cè)定特價(jià)供應(yīng)
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 英文名稱:Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液乳糖 250g/瓶 用于大腸群發(fā)酵測(cè)定現(xiàn)貨促銷
IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒 英文名稱:Human IPO-38 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)進(jìn)口/分裝
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。