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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠墨蝶呤還原酶(SPR)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Sepiapterin Reductase(SPR)ELISA Kit |
貨號 |
PM105190 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
五味子(北五味子) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
甘草酸單銨鹽 英文名稱 甘草酸銨 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Glycyrrhizic acid ammonium salt
醇二葡萄糖苷 英文名稱 Pinoresinol diglucoside 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
芥子堿硫酸鹽 英文名稱 Sinapine thiocyanate 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
刺五加苷B 英文名稱 Eleutheroside B 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 95%
藏紅花酸 英文名稱 Alpha-Crocetin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
魯斯可皂苷 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
瑞舒伐他汀鈣 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
安五脂素 英文名稱 供鑒別用 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
環(huán)嗪酮 標準品 CAS號:51235-04-2 100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
白當(dāng)歸腦 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ByakangelicolTF3標記的Lys賴氨FMOC-Lys(TF3)-OH
2-NBDG [2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)Amino)-2-Deoxyglucose]2-NBDG [2-(N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)Amino)-2-Deoxyglucose]
15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α (50 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15-keto-17-phenyl trinor PGF2α; 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α
3’-DeoxyadenosineCordycepin
EDTA Stock Solution (500 mM, pH 8。0) (500 mL)EDTA Stock Solution (500 mM, pH 8。0)
GW 788388 (10 mg)4-
11-(2-pyrrolidin-1-yl-ethoxy)-14,19-dioxa-5,7,26-triaza-tetracyclo[19.3.1.1(2,6).1(8,12)]heptacosa-1(25),2(26),3,5,8,10,12(27),16,21,23-decaeneSB1518 (Pacritinib)
10-Pyrene-PC (1 mg)1-O-hexadecanoyl-2-O-(10-(1-pyrenyl)decanoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-Palmitoyl-2-pyrenedecanoyl Phosphatidylcholine; 10-Pyrene-PC
TQ1 胺Tide Quencher 1 amine [TQ1 amine]
2-Iminothiolane HCl; 2-IT; Dihydro-2-(3H)-thiophenimine hydrochloride; Dihydro-2-(3H)-thiophenimine HClTraut’s Reagent
Hoechst 33342 (hydrochloride) (25 mg)Bisbenzimide|HOE 33342|NSC 334072; 2’-
12(S)-HETE (50 ug)12S-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 12(S)-HETE
小鼠墨蝶呤還原酶(SPR)ELISA試劑盒 TSN 瓊脂 250g/瓶 用于產(chǎn)氣莢膜梭的選擇性分離 和計數(shù)特價供應(yīng)
甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒英文名稱:Human thyroxine,T4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠白介素4(IL-4)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
TBB 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于乳酪產(chǎn)品中梭的計數(shù)現(xiàn)貨促銷
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱:Human cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝
強化梭鑒別瓊脂(DRCA) 250g/瓶 用于食品和其它物質(zhì)中梭的計 數(shù)和培養(yǎng)特價供應(yīng)
水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒英文名稱:Human Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit,48T/96T 進口/國產(chǎn)
強化梭培養(yǎng)基 250g/瓶 用于梭的培養(yǎng)現(xiàn)貨促銷
抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(anti-RV IgM)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝
強化梭瓊脂 250g/瓶 用于梭的分離培養(yǎng)特價供應(yīng)
D二聚體(D2D)ELISA試劑盒英文名稱:Human D-Dimer,D2D ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA Kit,48T/96T進口/國產(chǎn)
SC 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于產(chǎn)氣莢膜梭的計數(shù)和培養(yǎng)(ISO),需添加 21009 及 21001現(xiàn)貨促銷
單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 英文名稱:Human mocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T 進口/分裝