操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測，我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確，每次檢測均需做標準曲線。
薯蕷皂苷纖維二糖苷 英文名稱 Diosgenyl-3-di-β-O-glucopyranoside  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： 98%

延齡草苷 英文名稱 Trillin  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： ≥98%

敵凈 標準品  CAS號：5355-16-8 100MG 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量：

大葉茜草素 英文名稱 Rubimaillin  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%

亮氨酸 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： 鑒別

鹽酸伐昔洛韋 英文名稱 HPLC法含量測定  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn)

救必應(yīng) 英文名稱 中藥對照藥材  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

環(huán)磷腺苷 英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn)

凝血酶（牛血） 英文名稱 供尿激酶效價測定用  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn)

原蘇木素B 英文名稱 原巴西蘇木素  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： Protosappanin B

原參三醇(PPT) 英文名稱  PROTOPANAXATRIOL  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： ≥98%trans-Picetannol； Astringenin； trans-3，3’，4，5’-TetrahydroxystilbenePiceatannol

Docosahexaenoyl Glycine （5 mg）N-（1-oxo-4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z-docosahexaenyl）-glycine； Docosahexaenoyl Glycine

Oxy-16 （10 mg）cholest-5-ene-3b，20，22R-triol； 20（R），22（R）-dihydroxy Cholesterol； Oxy-16

Creatine Kinase Enzyme Mixture （7。5 mg）Creatine Kinase Enzyme Mixture

Δ4-Dafachronic Acid （1 mg）3-oxo-cholest-4-en-26-oic acid； 3-keto-4-Cholestenoic Acid； Δ4-Dafachronic Acid

V-PYRRO/NO （5 mg）1-[（ethenyloxy）-NNO-azoxy]-pyrrolidine； V-PYRRO/NO

10X杜氏磷緩沖液（6X500ML）Dulbecco’s PBS （10x）， 10X D-PBS without calcium and magnesium. Sterile filtered.

15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin D2 (10 mg)15-deoxy-Δ12,14-PGD2, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin D2, 9.alpha.-hydroxy-11-oxo-prosta-5Z,12E,14E-trien-1-oic acid

鈣離子熒光探針Fluo-3FF， AM 超級純Fluo-3FF， AM UltraPure grade

4-Pyridylthioamide （5 g）4-pyridinecarbothioamide； NSC 1607|Thioisonicotinamide； 4-Pyridylthioamide

DehydroepiandrosteroDHA-S|DHEAS|NSC 72822； 3β-（sulfooxy）-androst-5-en-17-one, monosodium salt

STAT-8-Isoprostane AP Tracer （100 dtn）STAT-8-epi PGF2α AP Tracer|STAT-8-iso PGF2α AP Tracer|STAT-8-iPF2α-III AP Tracer； STAT-8-Isoprostane AP Tracer

小鼠肌球蛋白ⅠA(MYO1A)免費代測ELISA Kit肺成纖維細胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）

雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 英文名稱：Chicken Laminin,LN ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T血紅蛋白C(HbC)ELISA Kit，48T/96T

支氣管上皮細胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit　Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T乙酰膽堿酯酶(ChE)ELISA Kit，48T/96T

支氣管成纖維細胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）

 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒英文名稱： rabbit Tissue-type Plasimigen Actilyse,t-PA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA Kit，48T/96T

心肌細胞 規(guī)格: 5 ×105次方（1ml）

兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒英文名稱：rabbit telomerase,TE ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA Kit，48T/96T

心肌成纖維細胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）

毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒英文名稱：Cobra vem factor,CVF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T生長調(diào)節(jié)致癌基因β(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA Kit，48T/96T

主動脈內(nèi)皮細胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）

山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒英文名稱：Goat Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠溶酶(LZM)ELISA Kit，48T/96T