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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠肌紅蛋白(MYO)免費(fèi)代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Myoglobin(MYO)ELISA Kit |
貨號(hào) |
PM105328 |
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
辛弗林 英文名稱 Synephrine 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
鷓鴣菜 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
梣酮 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
美他多辛 英文名稱 HPLC法含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
棓丙酯 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
,四溴菊酯標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 52918-63-5 100MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
β-谷甾醇 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: β-Sitosterol
文多靈 英文名稱 長春多靈; 長春花朵靈; 長春刀靈 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: Vindoline
(-)-薄荷酮 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
沙宗 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC法含量測定用
南鶴虱 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別8,9-EE-14(Z)-E (500 ug)(Z)-7-(3-(undec-5-enyl)oxiran-2-yl)heptanoic acid; 8,9-Epoxyeicosa-14(Z)-enoic Acid; 8,9-EE-14(Z)-E
2-Iodoamphetamine (hydrochloride) (5 mg)2-IA|o-IA|o-iodo-α-methyl-Phenethylamine|ortho-Iodoamphetamine; 2-iodo-α-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride
α-Pyrrolidinobutiothiophenone (hydrochloride) (10 mg)α-PBT; 2-(pyrrolidin-1-yl)-1-(thiophen-2-yl)butan-1-one, monohydrochloride
Docosahexaenoic Acid (250 mg)4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; Cervonic Acid|DHA; Docosahexaenoic Acid
ω-3 Arachidonic Acid ethyl ester (50 mg)ω-3 Arachidonic Acid ethyl ester, 8Z,11Z,14Z,17Z-eicosatetraenoic acid, ethyl ester
RGD Peptide (1 mg)glycyl-L-arginylglycyl-L-α-aspartyl-L-asparaginyl-L-proline; GRGDNP|H-Gly-Arg-Gly-Asp-Asn-Pro-OH; RGD Peptide
Prostaglandin F1α (5 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; PGF1α; Prostaglandin F1α
CAY10626 (1 mg)N-[2-(dimethylamino)ethyl]-N-methyl-4-[[[[4-[4-(4-morpholinyl)-7-(2,2,2-trifluoroethyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-yl]phenyl]amino]carbonyl]amino]-benzamide; CAY10626
Luzindole (25 mg)N-0774; N-[2-[2-(phenylmethyl)-1H-indol-3-yl]ethyl]-acetamide
BW 723C86 (1 mg)α-methyl-5-(2-thienylmethoxy)-1H-indole-3-ethanamine, monohydrochloride; BW 723C86
JWH 412 (10 mg)(4-fluoro-1-naphthalenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone; JWH 412
ADB-PINACA isomer 2 (10 mg)N-((2S,3S)-1-amino-3-methyl-1-oxopentan-2-yl)-1-pentyl-1H-indazole-3-carboxamide
小鼠肌紅蛋白(MYO)免費(fèi)代測ELISA Kit腎系膜細(xì)胞 規(guī)格: 5 ×105次方(1ml)
總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human total prostate s pecific antigen,tPSA ELISA Kit規(guī)格:96T/48TⅠ型膠原N末端肽(NTX)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
膀胱上皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒英文名稱:Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T激肽釋放酶11(KLK 11)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
膀胱平滑肌細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
吡哆醛/吡哆醇維生素B6磷酸酶(PDXP)ELISA試劑盒英文名稱:human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒英文名稱:Human phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒英文名稱:Human myosin light chain kinase,MLCK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
腎小管上皮細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒英文名稱:Human α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝