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我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Caspase 1(CASP1)ELISA Kit |
貨號 |
PM105386 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
Calu-1(肺細胞)5×106cells/瓶×2
MFC培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于水中糞大腸群的濾膜法測定(GB/T5057.12-2006)。
中性紅染色液規(guī)格:100ml
肺腺細胞英文名稱:NCI-H1395
大鼠軟骨細胞完全培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna
大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL
桿屬 Lactobacillus sp.光滑青霉 Penicillium glabrum
產(chǎn)毒培養(yǎng)基/Toxin-Producing Medium青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
中華鱉脾來源細胞英文名稱:CSSTSP1
Quoirin&Lepoivre Medium with vitaminsBR10升國產(chǎn)/進口
白血病抑制因子受體(LIFR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Leukemia Inhibitory Factor Receptor (LIFR)N-[(5aR,6aS,7S,9Z,10aS)-9-[amino(hydroxy)methylidene]-4,7-bis(dimethylamino)-1,10a,12-trihydroxy-8,10,11-trioxo-5,5a,6,6a,7,8,9,10,10a,11-decahydrotetracen-2-yl]-2-(tert-butylamino)acetamideTigecycline
Phosphate Buffer (250 dtn)Phosphate Buffer
Dextromethorphan (hydrobromide hydrate) (500 mg)(9α,13α,14α)-3-methoxy-17-methyl-morphinan, hydrobromide monohydrate; DXM; Dextromethorphan (hydrobromide hydrate)
PF-04691502 (5 mg)2-amino-8-[trans-4-(2-hydroxyethoxy)cyclohexyl]-6-(6-methoxy-3-pyridinyl)-4-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one; PF-04691502
Amisulpride (25 mg)4-amino-N-[(1-ethyl-2-pyrrolidinyl)methyl]-5-(ethylsulfonyl)-2-methoxy-benzamide; DAN 2163|Solian; Amisulpride
細胞膜熒光探針DiSC2(3)DiSC2(3) [3,3-Diethylthiacarbocyanine iodide]
GW 4869 (hydrochloride hydrate) (5 mg)3,3’-(1,4-phenylene)bis[N-[4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl]-dihydrochloride-2-propenamide; GW 4869 (hydrochloride hydrate)
Clonidine (hydrochloride) (500 mg)Catapres|Kapvay|ST 155; N-(2,6-dichlorophenyl)-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride
Leukotriene B4 AChE Tracer (500 dtn)Leukotriene B4 AChE Tracer
4(Z),7(Z),10(Z)-Tridecatrienoic Acid-d5 (50 ug)(4Z,7Z,10Z)-trideca-4,7,10-trienoic-12,12’,13,13,13-d5 acid; 4(Z),7(Z),10(Z)-Tridecatrienoic Acid-d5
2H-Pyrido[1’,2’:4,5]pyrazino[2,1-b][1,3]oxazine-9-carboxamide, N-[(2,4-difluorophenyl)methyl]-3,4,6,8,12,12a-hexahydro-7-hydroxy-4-methyl-6,8-dioxo-, (4R,12aS)-GSK1349572
化鋰Lithium chloride
小鼠胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA試劑盒葡萄球?qū)?/span> Staphylococcus sp.酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒英文名稱:Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T貓漢賽巴通體(CBH)ELISA Kit,48T/96T
費氏中華根瘤 Sirhizobium fredii猴
大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA Kit,48T/96T
MV3(黑色素瘤細胞)短小芽胞桿 Bacillus pumilus
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA Kit,48T/96T
珊瑚色諾卡氏 cardia corallineWB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞)
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒英文名稱:Rat glucoprotein 130,gp130 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T黑色素瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA Kit,48T/96T
草菇 Volvariella bombycina酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。