操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測，我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確，每次檢測均需做標準曲線。
牛津瓊脂基礎(chǔ)/OXA基礎(chǔ)/Oxford Agar Base單增李氏的選擇性分離250克國產(chǎn)/進口

蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensis黑木耳 Auricularia auricula

MR-VP培養(yǎng)基/MR-VP試驗用培養(yǎng)基/緩沖葡萄糖肉湯/葡萄糖磷酸鹽肉湯/MR VP Broth腸桿科細的甲基紅和VP試驗250克國產(chǎn)/進口

泡盛曲霉 Aspergillus awamori日本根霉 Rhizopus japonicus

7.5% NaHCO3溶液規(guī)格：100ml

NCI-H524(非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2

微黃八疊球 Sarcina subflava微紫青霉 Penicillium janthinellum

骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞)小鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基

RTE(大鼠氣管上細胞)5×106cells/瓶×2

腺成纖維細胞完全培養(yǎng)基枯草芽胞桿 Bacillus subtilisTrans （±）-2-Phenylcyclopropanamine， Hemisulfate； SKF trans-355； 2-PCPATranylcypromine Hemisulfate

Rosiglitazone Maleate （25 mg）5-[[4-[2-（methyl-2-pyridinylamino）ethoxy]phenyl]methyl]-2，4-thiazolidinedione， （2Z）-2-butenedioate （1:1）； Avandia|BRL 49653C； Rosiglitazone Maleate

1-Azakenpaullone9-bromo-7,12-dihydro-pyrido[3’,2’:2,3]azepino[4,5-b]indol-6（5H）-one

2，4-Difluoro-N-{2-（methyloxy）-5-[4-（4-pyridazinyl）-6-quinolinyl]-3-pyridinyl}benzenesulfonamideGSK-2126458

N1-Acetylspemidine （hydrochloride） （10 mg）N1-AcSPD； N-[3-[（4-aminobutyl）amino]propyl]-acetamide, dihydrochloride

（-）-（α）-Kainic Acid （50 mg）2S-carboxy-4S-（1-methylethenyl）-3S-pyrroldineacetic acid； （-）-（α）-Kainic Acid

4-SB 202190

Prostaglandin F2α Alcohol （5 mg）1，9。alpha。，11。alpha。，15S-tetrahydroxyprosta-5Z，13E-diene； AGN190190|PGF2α-OH|ZK 62717； Prostaglandin F2α Alcohol

5-OxoETE （50 ug）5-oxo-6E，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid； 5-KETE； 5-OxoETE

MreB peturbing Compound A22 （10 mg）（3,4-dichlorophenyl）methyl ester carbamimidothioic acid, monohydrochloride

17-trans Prostaglandin E3 （25 ug）17-trans PGE3； 9-oxo-11α,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E,17E-trien-1-oic acid

Chloride Standard （1 ea）Chloride Standard

小鼠肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)免費代測ELISA Kit小鼠睪間質(zhì)細胞瘤細胞厚垣孢普可尼亞 Pochonia chlamydosporia

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Methylase ELISA Kit 　規(guī)格:96T/48T小鼠孕/孕酮(PROG)ELISA Kit，48T/96T

HT-29, 結(jié)腸細胞HS 683(腦膠質(zhì)瘤細胞)

小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Vasoactive Intestinal Peptide,VIP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T維生素D受體(VD R)ELISA Kit，48T/96T

香菇 Lentinula edodes粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Somatostatin,SS ELISA Kit規(guī)格:96T/48TD二聚體(D2D)ELISA Kit，48T/96T

COLO 320(結(jié)腸細胞)香菇 Lentinula edodes

大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 英文名稱：Reat serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA Kit，48T/96T

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae支氣管上皮細胞

大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒英文名稱：Rat cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit，48T/96T

美濃鏈霉 Streptomyces miensis腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基

大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA Kit，48T/96T