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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:PM105462
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
詳情介紹:

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒

英文名稱

Mouse Secreted Frizzled Related Protein 1(SFRP1)ELISA Kit

貨號

PM105462

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。


樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

注意事項:

1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
蘇云金芽胞桿阿萊亞種 Bacillus thuringiensis subsp. alesti大鼠胰腺星狀細胞完全培養(yǎng)基

Western中低分子量蛋白Marker20次國產(chǎn)

輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL

TE-11(食管細胞)5×106cells/瓶×2

LS 180(結(jié)腸腺細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基尖孢鐮刀黃瓜專化型 Fusarium oxysporium f. sp. cucumerinum

慶大霉素瓊脂/Gentamycin Agar用于霍亂弧的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

酸球霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. Hordniae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

中分子量單一蛋白Marker(90 kD)50次國產(chǎn)

Hce-8693(盲腸腺細胞(未分化))5×106cells/瓶×2

彎曲血瓊脂基礎(chǔ)/Campylobacter Blood Agar Base250克國產(chǎn)/進口

小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒急性母細胞白血病細胞苜蓿中華根瘤 Sirhizobium meliloti

葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒 英文名稱:Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit規(guī)格:96T/48TB因子(BF)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePC-3M-IE8(前列腺高轉(zhuǎn)移細胞株)

甘露糖(MN)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Manse,MN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝

好食脈孢 Streptomyces venezuelae var.spiralis粘質(zhì)沙雷氏 Serratia marcescens

纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human plasmigen activator,PLGA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(sTRAIL)特價促銷

蘇云金芽胞桿幕蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus黑木耳 Auricularia auricula

高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠乳癌標志物-CA153ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝

大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基中分子量單一蛋白Marker(35 kD)

組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒英文名稱:Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA Kit,48T/96T 特價促銷

中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii小鼠肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基

微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒英文名稱:Human microtubule-associated protein 2,MAP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)ELISA Kit,48T/96T進口/原裝

操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
2)酶標板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

 

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